ATCC 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
细胞简介：
生长特性： | 贴壁生长
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细胞来源： | 从ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
培养条件： | 培养基：DMEM-H培养基+10%FBS（推荐HAKATA特级胎牛血清 货号：HS-FBS-50） 气相：空气95%，二氧化碳5% 温度：37℃ |
培养： | 贴壁细胞 1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代； 2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，*传代比例为1:2。 3传代步骤：将0.25%含EDTA胰酶置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入1mlPBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（*消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zui佳消化时间，记录zui佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入1ml*培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之*脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入*培养基重悬细胞，进行传代。 悬浮细胞 1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒，然后置于无菌操作台，打开瓶口，轻轻吹打后，将其中的细胞悬液转移到离心管中，然后1200rpm离心3min，去上清； 2.将离心好的细胞转移至T-25瓶中，并加入5-6mL新鲜培养基，然后将其置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液（离心后去旧液，加入新鲜培养基）； 3.显微镜观察细胞数目比较多时，对其进行传代，*传代比例为1:2（离心后平均分成两瓶培养）。
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细胞总数： | 1~3*106 |
传代周期： | 2-3天 |
传代比例： | 1:2~1:4 |
换液频率： | 2-3天 |
冻存液： | 90%FBS+10%DMSO |
注意事项：
1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2 瓶中运输的培养液不能重复使用，请换新鲜培养液培养
3 对于贴壁细胞，若大部分细胞漂浮，置于培养箱隔夜观察，大部分漂浮细胞重新贴壁，表明细胞活力正常，继续培养，剩余漂浮的细胞可以去掉；若大部分细胞仍然不贴壁，将漂浮的细胞离心收集，用台盼蓝染色鉴定细胞活力，并与本公司销售人员及时联系。
4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片，记录细胞状态，如细胞状态出现问题请于72h内与本公司销售联系，以便于更好的帮您解决问题，超过时间我段，本公司则默认细胞状态良好，不免费对后续细胞状态问题进行售后。
5 因细胞产品的特殊性，如客户对本公司细胞质量存有疑问，请于收到细胞后一个月内与本公司销售联系，超过时间段，本公司则默认细胞质量优良，不承担因细胞产生的任何责任。
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