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猪I型胶原蛋白(ColⅠ)ELISA试剂盒温育注意事项:
不同的温育环境对检测结果有影响,操作中应严格按照说明书控制温育时间及温度,并注意封闭避免边缘效应。
为确保各板温度都能迅速达到平衡,不可将反应板叠加放置,设定的温度及时间严格按照说明书进行,一般加入待测标本后使其与固相抗原(抗体)置于37℃环境下温育。因为很多恒温箱的构造,温度及检测的温度并非酶标板温育温度,所以使用恒温箱温育时建议将温度计置于酶标板旁,保证酶标板旁温度为37℃。
干育和水温的影响差异较为明显,建议使用水温,注意将固相板放入水中,防止受热不均匀。
试剂盒一般设定的反响温度为 37℃,在这个温度下放置 30 分钟,蒸腾的水分会许多,对于全部反响体系来讲,各种反响物的浓度会不断添加,这么必会致使反响毕竟的值添加,温育时贴封片或加盖,避免标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁。
试剂盒断定的一定温度下的反响时间并不是反响的完毕,添加反响的温度,会加速反响,一样添加时间会延伸反响,这么得到的反响程度会比试剂盒断定的反响程度多,也会引起阴性高值或假阳性。