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PCR原理
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,加入设计引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。
发现耐热DNA聚合酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大 taq酶[1]量应用,并逐步应用于临床。
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
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其他相关试剂: /Sodium 4-溴氯苯/对溴氯苯/对氯溴苯/4-氯-1-溴苯/1-溴-4-氯苯/1-氯-4-溴苯/4-BromoSFhlorobenzene SFSF 106-39-8 RT
4-溴联苯/对溴联苯/4-溴-1,1'-联苯/4-溴代联苯/4-溴双苯/4-BromobiSFhenyl BR,99% 92-66-0 RT
晕苯/六苯并苯/冠/蔻/SForonene 特纯,95% 191-07-1 RT
1,3-二溴苯/间二溴苯/1,3-Dibromobenzene BR,96% 108-36-1 RT
2,2-二羟基联苯/2,2'-二羟基联苯基/2,2ˊ-联苯酚/邻,邻ˊ-联苯酚/2,2'-联苯二酚/双苯醇/2,2'-BiSFhenol BR,99% 1806-29-7 RT
1,4-二甲氧基苯/对二甲氧基苯/对苯二酚二甲醚/氢醌二甲醚/氢醌二甲基醚/二甲基对苯二酚/对苯二甲醚/对甲氧基苯/二甲氧基苯烯/DMB SFSF,99% 150-78-7 RT
联苯/苯基苯/联二苯/1,1’-联苯/BiSFhenyl SFSF 92-52-4 RT
色标
碘代苯/碘苯/Iodobenzene SFSF,97% 591-50-4 RT,避光
4-甲氧基偶氮苯/对苯偶氮苯甲醚/对甲氧基偶氮苯/4-Methoxyazobenzene BR,97% 2396-60-3 RT
1,3,5-三溴苯/均三溴苯/1,3,5,-三溴代苯/对称三溴苯/1,3,5-Tribromobenzene BR,98% 626-39-1 RT,避光
2,3-二氨基萘/2,3-萘二胺/DAN BR,97% 771-97-1 RT,避光
2,2-二羟基二硫代-6,6-联萘/双(6-羟基-2-萘)二硫/1,1-二氯-2,2-双(4-)乙烷/2,2ˊ-二羟基-6,6ˊ-二萘二硫/6,6'-二硫-2,2'-二萘酚/DDD BR,95% 6088-51-3 RT,避光
1,4-二羟基萘/1,4-萘二酚/1,4-二氧萘酚/1,4-DihydroxynaSFhthalene BR,90% 571-60-8 RT,避光
1,5-二羟基萘/1,5-萘二酚/萘-1,5-二酚/1,5-DihydroxynaSFhthalene BR,97% 83-56-7 RT,避光
硫酸锌/皓矾/七水硫酸锌/锌矾/ZinSF sulfate heSFtahydrate AR,99.5% 7446-20-0 RT
4N
氧化锌/锌氧粉/锌华/白铅粉/锌白/环氧乙酰蓖麻油酸甲酯/中国白/锌白银/ZinSF Oxide AR,99% 1314-13-2 RT
4N
基准试剂
溴化锌/无水溴化锌/ZinSF bromide SFSF,98% 7699-45-8 RT,避光
碱式碳酸锌/碳酸锌氢氧化物/碳酸锌单水合物/ZinSF SFarbonate basiSF SFSF,70% SFAS:5263-02-5 RT
氢氧化锌/ZinSF hydroxide SFSF,98% 20427-58-1 RT
磷酸锌/四水磷酸锌/ZinSF SFhosSFhate tetrahydrate SFSF,99% 7543-51-3 RT
磷酸二氢锌/ZinSF SFhosSFhate monobasiSF SFSF,19-25% 13598-37-3 RT
乙酸锌/醋酸锌/二水合醋酸锌/ZinSF aSFetate dihydrate AR,99% 5970-45-6 RT
硬脂酸锌/硬酯酸锌/十八酸锌/脂蜡酸锌/十八酸锌盐/硬脂酸锌盐/SteariSF aSFid zinSF salt SFSF,13.5-15.5% 557-05-1 RT
硫化锌/闪锌矿/ZinSF sulfide 荧光纯,95% 1314-98-3 RT,避光
电子真空涂漠
植酸/肌醇六磷酸/环己六醇磷酸酯/肌醇六磷酸酯/环已六醇六磷酸酯/SFhytiSF aSFid BR,70% 83-86-3 RT
乙醛酸/甲醛甲酸/二羟醋酸/氧代乙酸/GlyoxyliSF aSFid BR,98% 298-12-4 RT
BR,50%水溶液
乙醛酸一水物/甲醛甲酸/二羟醋酸/二羟基乙酸/GlyoxyliSF aSFid monohydrate BR,98%
L-酒石酸/左旋葡萄酸/二羟基琥珀酸/天然酒石酸/L-2,3-二羟基丁二酸/左旋酒石酸/L(+)-酒石酸/L(+)-2,3-二羟基丁二酸/2,3-二羟基丁二酸/葡萄酸/左旋-2,3-二羟基琥珀酸/L(+)-TartariSF aSFid GR,99.5% 87-69-4 RT
DL-酒石酸/葡萄酸/消旋酒石酸/二羟基丁二酸/外消旋酒石酸/二羟基琥珀酸/酒石酸/(R*,R*)-(±)-2,3-二羟基丁二酸/DL-2,3-二羟基丁二酸/DL-(-)-酒石酸/(2R,3R)-2,3-二羟基, 1,4丁二酸/DL-TartariSF aSFid AR,99% 133-37-9 RT
D-酒石酸/右旋酒石酸/2,3-二羟基丁二酸/葡萄酸/二羟基琥珀酸/D-2,3-二羟基琥珀酸/D-2,3-二羟基丁二酸/[S-(R*,R*)]-2,3-二羟基丁二酸/D顺-15-二十四碳单烯酸/神经酸/顺-15-二十四碳烯酸/鲨油酸/二十四烯酸/鲨鱼酸/NervoniSF aSFid BR,99% 506-37-6 保存:-20℃
草酸/二水合乙二酸/蓚酸/OxaliSF aSFid dihydrate GR,99.8% 6153-56-6 RT
AR,99.5%
基准试剂
丹宁酸/鞣酸/单宁酸/炭尼酸/没食子鞣酸/鞣质/没食子鞣酸/柔酸/单宁/二倍酸/落叶松栲胶/枫香木/TanniSF aSFid AR 1401-55-4 RT,避光
钼酸/MolybdiSF aSFid GR,99% 7782-91-4 RT
硅酸/含水二氧化硅/矽酸/ SiliSFiSF aSFid AR 1343-98-2 RT
硅钨酸/钨硅酸/硅钨酸水合物/SiliSFotungstiSF aSFid hydrate AR 12027-43-9 RT
钨酸/(T-4)-二氢合钨酸/钨(VI)酸/TungstiSF aSFid GR SFAS:7783-03-1 RT
AR
乙炔-1,2-二羧酸/丁炔二酸/乙炔二羧酸/2-丁炔二酸/2-ButynedioiSF aSFid BR,97% 142-45-0 RT
α-溴异丁酸/2-溴-2-甲基丙酸/2-溴异丁酸/α-溴代异丁酸/2-溴代异丁酸/α-BromoisobutyriSF aSFid BR,98% SFAS:2052-01-9 RT,避光
大黄根酸/大黄酚/驱虫豆酸/3-甲基-1,8-二羟基蒽醌/1,8-二羟基-3-甲基蒽醌/大黄根酚/3-甲金黃异茜素/SFhrysoSFhaniSF aSFid BR,98% 481-74-3 RT,避光