NP-40裂解液

P0910      NP-40裂解液    NobleRyder  100ml      220.00

我们生产的（NP-40 Lysis Buffer）是一种比较温和的细胞组织裂解液。裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP和co-IP等。
关于我们生产的不同的裂解液的主要特点和差异，以及如何选择裂解液可参考附录。
的主要成分为50mM Tris（pH7.4），150mM NaCl，1% NP-40以及2mM sodium pyrophosphate，25mM β-glycerophosphate，1mM EDTA，1mM Na3VO4，0.5 ug/ml leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。
用裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

保存条件：
-20℃保存，一年有效。
注意事项：

裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
为取得*的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
关于裂解液的选择，一方面可以参考我们生产的各种裂解液主要特点、差异，选择合适的裂解液；另一方面也需要通过一些预实验来摸索*的适合您实验条件的裂解液。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
对于培养细胞样品：
1. 融解，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的zui终浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍（如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗）。按照6孔板每孔加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作