（一）、仪器设备
  1. 18cm不锈钢高压锅或电炉或用微波炉.
  2. 水浴箱

（二）、试 剂
  1. PBS缓冲液（pH7.2―7.4）

  2．0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液（CB,pH6.0,1000ml
  3．0.5mol/L EDTA缓冲液（pH 8.0）
  4. 1mol/L的TBS缓冲液（pH 8.0）

  5. 酶消化液：a.0.1%胰蛋白酶  b.0.4%胃蛋白酶液
  6. 3%甲醇―H₂O₂溶液
  7. 风裱剂：a. 甘油和0.5mmol/L碳酸盐缓冲液（pH 9.0–9.5）等量混合b油和TBS(PBS)配制
  8．TBS/PBS pH 9.0–9.5,适用于荧光纤维镜标本; pH 7.0-7.4适合光学纤维标本
（三）、操作流程
  1、脱蜡和水化

   脱蜡前应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。
  a 组织芯片置于二甲苯中浸泡10分钟,更换二甲苯后再浸泡10分钟
  b 无水乙醇中浸泡五分钟
  c 95%乙醇中浸泡五分钟
  d 75%乙醇中浸泡五分钟
  2、抗原修复

   用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片：
  A 抗原热修复
  a 高压热修复 在沸水中加入EDTA(pH8.0)或0.01mmol/L枸橼酸钠缓冲溶液（pH6.0）.盖上不锈钢锅盖，但不能锁定。将玻片置于金属染色加上，缓慢加压，是玻片在缓冲液中浸泡五分钟，然后将盖子锁定，小阀门将会升起来。10分钟后除去热源，置入凉水中，当小阀门沉下去后打开盖子。此方法适用于较难检测或核抗原的抗原修复。b沸热修复 电炉或水浴锅加热0.01枸橼酸钠缓冲液（pH 6.0）至95℃左右，放入组织芯片加热10-15分钟。 c微波炉加热在微波炉里加热0.01枸橼酸钠缓冲液（pH6.0）至沸腾后将组织芯片放入，断电，间隔5-10分钟，反复1-2次。适用的抗原：Bcl-2.Bax.AR.PR.C-fos.x-jum.z-kit.c-myc.E-cadherin.ChromograninA.Cyclin.ER.Heatshock.Protein.HPV.Ki-67.MDMZ.P53.P34.P15.P-glycoprotein.PKC.PCNA.ras.Rb.等
   B 酶消化方法

   在抗原酶消化修复中，常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前预热37℃，消化时间约为5-30分钟。适用于被固定遮蔽的抗原：包括 Collagen.GFAP. Complement.Cytokeratin.C-erB-2.LCA.LN.等
   3、免疫组化染色SP法
  （1） 脱蜡、水化
  （2）PBS洗2-3次各5分钟
  （3）3% H₂O₂(80%甲醇)滴加在TMA上，室温静置10分钟
  （4）PBS洗2-3次各5分钟
  （5）抗原修复
  （6）PBS洗2-3次各5分钟
  （7）滴加正常山羊血清封闭液，室温20分钟，甩去多余液体
  （8）滴加Ι抗50μl,室温静置1小时或4℃次日或37℃1小时
  （9）4℃次日后需在37℃复温45分钟
  （10）PBS洗3次每次2分钟
  （11）滴加Ⅱ抗45-50μl,室温静置或37℃1小时
  （12）Ⅱ抗中可加入0.05%的 tween-20.
  （13）PBS洗3次各5分钟
  （14）DAB显色5-10分钟，在显微镜下掌握染色程度
  （15）PBS或自来水冲洗10分钟
  （16）苏木精复染2分钟，盐酸酒精分化
  （17）自来水冲洗10-15分钟
  （18）脱水、透明、封片、镜检。
  4、SABC法
  （1） 脱蜡、水化
  （2）PBS洗2次各5分钟
 （3）用蒸馏水或PBS配制新鲜的3%H₂O₂，室温封闭5-10分钟，用蒸馏水洗3次
  （4）抗原修复
  （5） PBS洗5分钟  
  （6）滴加正常山羊血清封闭液，室温20分钟，甩去多余液体
  （7）滴加Ι抗50μl,室温静置1小时或4℃次日后或37℃1小时
  （8）PBS洗3次各2分钟
  （9）滴加生物素化Ⅱ抗，20℃-37℃ 20分钟
  （10）PBS洗3次各2分钟
  （11）滴加试剂SABC 20℃-30℃ 20分钟
  （12） PBS洗4次各5分钟
  （13） DAB显色：试剂盒或自配显色剂显色
  （14）脱水、透明、封片、镜检。