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CTL酶联免疫斑点分析仪应用新发表关于“COVID”研究的文献

时间:2021-01-06      阅读:414

我们的一份关于COVID的论文已经提交-预印本已经可以在线获取并免费分发(下面的“ biorxiv”链接):
亚历山大·雷曼(Alexander Lehmann),格雷格(Greg A)解卷积T细胞对SARS-CoV-2的反应:特异性与偶然交叉和同源交叉反应。 2020年。提交给免疫学前沿。 bioRxiv:
主要消息是:
通过使用IFN-g ELISPOT(可检测效应细胞),可以区分SARS-CoV-2感染者与未感染人类。根据文献,其他基于流式细胞术的技术,如AID,多聚体,CFSE稀释在未感染的个体中提供了假阳性结果,据称是由于检测到与季节性冠状病毒交叉反应的中央记忆细胞而引起的普通感冒(或者只是没有被足够敏感,可以在频率相当低时提供干净的数据)

SARS-CoV-2上的几种蛋白质抗原具有免疫原性,需要进行监测以检测所有感染的个体(祝您好运的多聚体仅观察一种/几种肽)。

我们在这里表明,T细胞亲和力测量(肽库的串行稀释)对于明确区分SARS-CoV2感染/未感染也很重要。由于(a)有效的电池利用率,以及(b)高吞吐能力且几乎不涉及人工,因此可以使用ELISPOT轻松实现。

无关的大型肽池作为特异性控制:随着越来越多的科学家开始理解T细胞免疫监测不能依赖于几种肽(多聚体),越来越多的人(包括SARS-CoV-2 T细胞诊断中的大多数)使用巨型肽池。但是,到目前为止,尚未确定这是一种有效的方法–我们在这里做到了!Our first paper on COVID has just been submitted – the pre-print is already available online and free for distribution (the “biorxiv” link below):
 
Alexander Lehmann, Greg A Kirchenbaum, Ting Zhang, Pedro A Reche, Paul V Lehmann. Deconvoluting the T cell response to SARS-CoV-2: specificity versus chance- and cognate cross-reactivity. 2020. Submitted to Frontiers in Immunology. bioRxiv:
The main messages are:
 
By using IFN-g ELISPOT (that detects effector memory cells) one can distinguish between SARS-CoV-2 infected vs non-infected humans. Based on the literature, other flowcytometry-based techniques like AID, multimers, CFSE dilution provide false positive results in non-infected individuals allegedly due to detecting central memory cells that cross-react with seasonal coronaviruses causing common cold (or, just by not being sensitive enough to provide clean data when the frequencies are rather low)
 
Several protein antigens on SARS-CoV-2 are immunogenic and need to be monitored to detect all infected individuals (good luck multimers looking at one/few peptide(s) only.)
 
We show here that T cell affinity measurements (serial dilution of peptide pools)are also important for a clear SARS-CoV2 infected/non-infected distinction. Such can be easily done with ELISPOT due to (a) efficient cell utilization, and (b) high throughput capability with little labor involved.
 
Irrelevant mega peptide pools as specificity controls: as more and more scientists start to understand that T cell immune monitoring cannot rely on few peptides (multimers), more and more (including most in SARS-CoV-2 T cell diagnostic) use mega peptide pools. However, it has not been so far established that this is a valid approach – we did it here!

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