基于蒸发光检测器ELSD的知母皂苷BII的含量检测
时间:2019-06-10 阅读:1226
- 知母(测试物质:知母皂苷BII)
知母 Zhimu ANEMARRHENAE RHIZOMA
本品为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides. Bge.的干燥根茎。春、秋二季采挖,除去须根和泥沙,晒干,习称“毛知母”;或除去外皮,晒干。
【性状】本品呈长条状,微弯曲,略扁,偶有分枝,长3〜15cm,直径0. 8〜1. 5cm,一端有浅黄色的茎叶残痕。表面黄棕色至棕色,上面有一凹沟,具紧密排列的环状节,节上密生黄棕色的残存叶基,由两侧向根茎上方生长;下面隆起而略皱缩,并有凹陷或突起的点状根痕。质硬,易折断,断面黄白色。 气微,味微甜、略苦,嚼之带黏性。
【鉴别】(1)本品粉末黄白色。黏液细胞类圆形、椭圆形或梭形,直径53〜247pm,胞腔内含草酸钙针晶束。草酸钙针 晶成束或散在,长26〜110pm。
取本品粉末0. 5g,加稀乙醇10ml,超声处理20分钟, 取上清液作为供试品溶液。另取芒果苷对照品,加稀乙醇制 成每lml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法 (通则0502)试验,吸取上述两种溶液各知4μl,分别点于同一聚酰胺薄膜上,以乙醇-水(1 : 1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365 n m)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
取本品粉末0. 2g,加30%丙酮10ml,超声处理20分钟,取上清液作为供试品溶液。另取知母皂苷BII对照品,加 30%丙酮制成每lml含lmg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述两种溶液各4μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇-冰醋酸-水(4 : 1 : 5)的上 层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以香草醛硫酸试液,在 l05°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
【检查】水分 不得过12. 0%。
总灰分 不得过9.0%。
酸不溶性灰分 不得过4.0%。
【含量测定】芒果苷 照液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.2%冰醋酸水溶液(15 : 85)为流动相;检测波长为258nm。理论板数按芒果苷峰计算应不低于6000。
对照品溶液的制备 取芒果苷对照品适量,精密称定,加稀乙醇制成每lml含50μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约0.1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇25ml,称定重量,超声处理(功率400W,频率40kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 1 μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品按干燥品计算,含芒果苷(C19H18O11)不得少于0. 70%。
知母皂苷BII 照液相色谱法测定。
色谱条件与系统适用性试验 以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(25 : 75)为流动相;蒸发光散射检测器检测(漂移管温度:65度,气体流速3l/min,气体压力:3.8bar)。理论板数按知母皂苷BII峰计算应不低于10000。
对照品溶液的制备 取知母皂苷BII对照品适量,精密称定,加30%丙酮制成每lml含0.50mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备取 本品粉末(过三号筛)约0. 15g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入30%丙酮25ml,称定重量,超声处理(功率400W,频率40kHz) 30分钟,取出,放冷, 再称定重量,用30%丙酮补足减失的重量,摇匀。滤过,取续 滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl,供试品溶 液5〜l0μl,注入液相色谱仪,测定,用外标两点法对数方程计算,即得。
本品按干燥品计算,含知母皂苷Bn (C45H76 019 )不得少于3. 0%。
饮片
【炮制】知母 除去杂质,洗净,润透,切厚片,干燥, 去毛屑。
本品呈不规则类圆形的厚片。外表皮黄棕色或棕色,可见少量残存的黄棕色叶基纤维和凹陷或突起的点状根痕。切面黄白色至黄色。气微,味微甜、略苦,嚼之带黏性。
【检查】酸不溶性灰分同药材,不得过2. 0%。
【含量测定】同药材,含芒果苷(C19H18O11)不得少于 0.50%,含知母皂苷BII (C45H76〇19)不得少于3. 0%。
【鉴别】【检查】(水分 总灰分)同药材。
盐知母 取知母片,照盐水炙法炒干。
本品形如知母片,色黄或微带焦斑。味微咸。
【检查】酸不溶性灰分 同药材,不得过2. 0%。
【含量测定】同药材,含芒果苷(C19H18O11)不得少于 0.40%,含知母皂苷BII (C45H76019 )不得少于2. 0%。
【鉴别】【检查】(水分 总灰分)同药材。
【性味与归经】苦、甘,寒。归肺、胃、肾经。
【功能与主治】清热泻火,滋阴润燥。用于外感热病,高 热烦渴,肺热燥咳,骨蒸潮热,内热消渴,肠燥便秘。
【用法与用量】6〜12g。
【贮藏】置通风干燥处,防潮。