1.RNA提取的样品很重要，包括样品的质量，细胞数，杂质含量等等，建议：按照说明书的要求，每毫升TRIzol不超过100mg再低些在50mg左右;样品的质量一定要控制好；研磨得时间不宜过长，成粉状即可，液氮常加（研磨的意义主要是使细胞与TRIzol的作用更充分，如有团块挑出取质舍量）；作用时间15分钟；

 

2.氯仿抽提，一定要混匀，剧烈些没关系。但一定要充分作用；

 

3.异丙醇沉淀，混匀，冰上操作会在一定程度上增加RNA产量；

 

4.75%乙醇清洗一次即可，速度我一般选择高速8000g-10000g之间的，结果都可；

 

5.检样，zui主要的是配置的琼脂糖胶和电泳缓冲液一定要避免RNA酶的污染，如果有固相RNA酶去除剂，可以用其处理电泳槽5-10后（时间以说明书为准），用高压后的DEPC水冲洗即可，方便，呵呵；

 

以上是我认为在RNA提取过程的体会，欢迎大家讨论，至于反应的时间按照说明书调整，其实说明书已经放的比较宽了，这个我觉得没有必要讨论。