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肉碱（L-Carnitine） ELISA 试剂盒

需要而未提供的试剂和器材

1.   37℃恒温箱。

2.   标准规格酶标仪。

3.   精密移液器及一次性吸头

4.   蒸馏水，

5.   一次性试管

6.   吸水纸

肉碱（L-Carnitine） ELISA 试剂盒

注意事项

1.   从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2.   各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差

3.   建议所有标准品、样本都做双份检测。

4.   严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

5.   为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

6.   不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

7.   底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

酶与抗体交联，常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行，标记效果好，特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为：将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中，加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠（NaIO4）水溶液0.5ml，混匀置4℃冰箱30分钟 ， 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml，室温放置30分钟后加入含5(g纯化抗体的水溶液1ml，混匀并装透析袋，以0.05mol/L、pH9.5的碳酸盐缓冲液于4℃冰箱中慢慢搅拌透析6小时（或过夜）使之结合，然后吸出，加硼氢化钠（NaBH4）溶液（ 5(g/ml)0.2ml，置4℃冰箱2小时，将上述结合物混合液加入等体积饱和硫酸铵溶液，置4℃冰箱30分钟后离心，将所得沉淀物溶于少许0.02mol/L、pH7.4PBS中，并对之透析过夜（4℃），次日离心除去不溶物，即得到酶标抗体，用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml，进行测定后，冷冻干燥或低温保存。