黄曲霉毒素M_1检测试剂盒

黄曲霉毒素具有很强的毒性和潜在致癌性,是真菌Aspergillus flavus和Aspergillus parasiticus变种的高毒代谢物。Aflatoxin M1是Aflatoxin B1的转化物,由食用含有Aflatoxin B1饲料的动物分泌至奶汁中。为了对黄曲霉毒素进行有效监控,必须有灵敏、特异、快速、可靠、容易普及的方法进行检测作为保障。为了对制备的单克隆抗体进行检测,本文根据江永华等的报道,对其方法进行改进,用EDC法制备出黄曲霉毒素M1与卵清白蛋白的结合全抗原。本课题利用潘崴所得到的杂交瘤细胞株,制备腹水,采用正辛酸硫酸铵法和硫酸铵法对其进行了纯化,得到了大量黄曲霉毒素M1单克隆抗体;制备了酶标黄曲霉毒素M1抗体;建立了竞争法ELISA测定黄曲霉毒素M1的方法,并在此基础上制备了黄曲霉毒素M1酶免疫检测试剂盒。很多发达国家对乳中的黄曲霉毒素进行了测定,我国对乳制品中的黄曲霉毒素也进行过局部小范围内的调查,本课题在上海(光明)、石家庄(三鹿)、天津(海河)等国家主要乳制品产地进行大范围的采样,利用本实验室制备的试剂盒对168个原料乳奶样中的黄曲霉毒素M1进行了检测,均符合国家标准0.5 ppb,其中有两个原料奶的黄曲霉毒素M1含量介于0.25-0.5ppb之间,约占1.2%,其余均小于0.25ppb。根据所测结果制定出合理的黄曲霉毒素预警值0.25ppb,符合我国现状,有利于逐步与接轨。

• *章 前言8-26
• 1.1 食品中的真菌毒素8-10
• 1.2 黄曲霉毒素的研究概况10-17
• 1.3 分析方法17-18
• 1.4 黄曲霉毒素在食品中的污染及*18-25
• 1.5 课题研究依据25-26
• 第二章 单克隆抗体技术的简介及ELISA 方法的技术要点26-41
• 2.1 单克隆抗体技术的简介26-28
• 2.2 ELISA 方法的技术要点28-35
• 2.3 ELISA 的类型35-41
• 第三章 实验方法与材料41-52
• 3.1 细胞的冻存与复苏41
• 3.2 单克隆抗体的大量制备41-42
• 3.3 黄曲霉毒素M1-OVA 全抗原的制备42-44
• 3.4 电泳44-47
• 3.5 抗体的纯化47-49
• 3.6 酶-抗体结合物的制备49-50
• 3.7 试剂盒检测黄曲霉毒素 M150-52
• 第四章 结果52-61
• 4.1 黄曲霉毒素M1全抗原的制备52-54
• 4.2 所得腹水和纯化后黄曲霉M1抗体的电泳图54
• 4.3 ELISA 方法检测原料奶中黄曲霉毒素的数据54-61
• 第五章 分析与讨论61-77
• 5.1 数据处理分析61-72
• 5.2 讨论72-77
• 第六章 结论77-79
• 参考文献79-83
• 论文、参加科研情况说明及学位论文使用授权说明83-84