水中挥发酚的测定采用4-氨基安替比林分光光度法，实验原理、适用范围、所需试剂、干扰消除及结果计算等参照国标HJ503-2009。

一、操作步骤

1、样品加热蒸馏，待馏出液接近250ml时，停止加热，用蒸馏水定容至250ml。

2、将250ml馏出液依次全部转移至本公司萃取仪500ml萃取瓶中。

3、在各个水样萃取瓶中依次手动加入2.0ml缓冲溶液，混匀溶液。

4、依次手动加入1.5ml的4-氨基安替比林溶液，混匀溶液。

5、依次手动再加入1.5ml铁KCN，使得试剂与水样混匀，再静置10min。

6、萃取瓶中仪器自动或手动依次加入10mlCHCl₃，选择执行文件1-6中的放上水样的相对应的按键并点击开始萃取，仪器开始同时萃取水样，萃取时间为2分钟 。萃取完后，静置分层。

7、用干脱脂棉或滤纸拭干分液活塞颈管内壁，于颈管内塞一小团干脱脂棉或滤纸，并插入到萃取瓶将CHCl₃层通过干脱脂棉团或滤纸，弃去最初滤出的数滴萃取液后，将余下CHCl₃直接放入到比色皿中。

8、于460nm波长，30mm比色皿以CHCl₃为参比，测定吸光度。

9、空白实验：蒸馏水代替试样，按4-10步骤测定其吸光度。空白与试样测定。

二、注意事项

1、缓冲溶液为氨水配置，所以在混匀时萃取强度不宜过高，在适宜强度下要保证充分混合均匀，否则会造成空白偏大。

2、氯仿萃取时分层效果很关键，得确保萃取充分且分层清晰，不然会影响挥发酚的测定结果。

3、放液时要成滴，不能成线。