使用POSITISIL® ODS-1 5um 4.6X250mm色谱柱，参照《中国药典》高效液相色谱法对决明子提取物进行含量测定，检测大黄酚、橙黄决明素，可满足实验要求。

对照品溶液的制备取大黄酚对照品、橙黄决明素对照品适量，精密称定，加无水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液制成每1ml含大黄酚30μg、橙黄决明素20μg的混合溶液，即得。

供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，蒸干，加稀/盐酸30ml，置水浴中加热水解1小时，立即冷却，用三氯jia烷振摇提取4次，每次30ml，合并三氯jia烷液，回收溶剂至干，残渣用无水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液使溶解，转移至25ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

色谱条件

色谱柱：POSITISIL® ODS-1 5um 4.6X250mm

流动相：A 乙腈   B 0.1%磷酸溶液

             B conc. 60%（0-15min）

                60→10%（15-30min）

                 0%（30-40min）

流 速：1 mL/min

柱 温：25 ℃

波 长：UV 284nm

进样量：10μL

理论板数按橙黄决明素峰计算应不低于3000。