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¥4000中文名称:“兔子白介素1(IL-1)ELISA试剂盒”
组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
规格:96T/48T
性状:液体
保存:2-8℃
有效期:6个月
ELISA试剂盒的性能:
准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
灵敏度:zui低检测浓度小于10 pg/ml。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
ELISA试剂盒的必知项:
1. 水溶性、低黏度、无腐蚀、不易燃、*。
2. 所采用的方法特异性好,灵敏度、准确度、精密度。
3. 所用标准品或标准参考物符合推荐标准和要求。
4. 贮存期至少为1年。
“兔子白介素1(IL-1)ELISA试剂盒”操作说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不*之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(240 ng/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
120 ng/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
60 ng/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
30 ng/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
15 ng/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
7.5 ng/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
ELISA试剂盒的优点体现:
·特异性高:进行了广泛的非特异性排查,避免了由于交叉反应和干扰导致的实验数据误差。
·精 度 高:通过加标回收率和线性稀释实验,确保样本值的准确性,精确度高于同类产品(较低的CV%)。
·重复性好:lot-to-lot检测确保zui小的批间差异。
·可靠性强:经优化的试剂盒组分可有效的zuzhi假阳性和假阴性试验结果。
·标准曲线:在保证精准数据的前提下提供较宽的检测范围,以满足需求。
·价格低廉:*RD试剂,国内分装配置,大大减少了客户因为价格高而必须购买国产试剂盒的顾虑。
正确操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件
1. 加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
2. 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
3. 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4. 合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
标本处理
1、 只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。
2、 实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
3、 若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。
4、 使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致 ELISA实验结果偏差。
5、 若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素 较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
6、 某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。
7、 建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏 差。