产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素B(NetB)

DB1715-QT产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素B(NetB)

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2000 1

具体成交价以合同协议为准
2024-12-06 10:04:23
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属性:
供货周期:现货;规格:96T;货号:DB1715-QT;主要用途:仅供科研;
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产品属性
供货周期
现货
规格
96T
货号
DB1715-QT
主要用途
仅供科研
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上海沪鼎生物科技有限公司

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产品简介

产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素B(NetB)ELISA试剂盒用于测定微生物样本中产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素B(NetB)含量。

详细介绍

检测范围:1.6pg/ml- 70pg/ml

使用目的:

本试剂盒用于测定微生物样本中产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素BNetB含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素BNetB水平。用纯化的产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素BNetB抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素BNetB再与HRP标记的产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素BNetB抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻-底洗涤后底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素BNetB呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素BNetB浓度。

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(120pg/ml

0.5ml×1

3

标包被

12孔×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml×1

11

封板膜

2

6

显色剂B

6ml×1/

12

密封袋

1

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

60pg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

30pg/ml

4号标准品

150μl5号标准品加入150μl标准品稀释液

15pg/ml

3号标准品

150μl4号标准品加入150μl标准品稀释液

7.5pg/ml

2号标准品

150μl3号标准品加入150μl标准品稀释液

3.75pg/ml

1号标准品

150μl2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟  

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外

7. 温育:操作同3

8. 洗涤:操作同5

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.

10. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进行。


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