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GES-1(人胃粘膜细胞)

时间:2017-07-05      阅读:932

 

GES-1(人胃粘膜细胞)

 

1.Origin and General Characteristics

 

Cell Name

GES-1

Organism

Homo sapiens, human

Age

 

Tissue

 

Morphology

epithelial

Growth Properties

adherent

Descriptions

 

Biosafety Level

 

2.Culture Conditions and Handling

Complete Growth Medium

RPMI-1640 (150110)+10% FBS (164210-500)+1% P/S (180120)

 

Remove and discard culture medium. Briefly rinse the cell layer with DPBS

 

solution to remove all traces of serum that contains trypsin inhibitor.

 

Add 1.0 to 2.0 mL of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells

 

under an inverted microscope until cell layer is dispersed (usually within 3

Subculturing

to 5 minutes). Cells that are difficult to detach may be placed at 37°C to

 

facilitate dispersal.

 

Add 4.0 to 6.0 mL of complete growth medium and aspirate cells by gently

 

pipetting. Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture

 

vessels.

Subc*tion Ratio

1:2-1:4

Medium Renewal

every 2 to 3 days

Cryopreservation

Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10% DMSO

Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

 

Culture Conditions

Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%

Temperature: 37

 

3.Special Features of the Cell Line

Tumorigenic

 

Effects

 

Receptor Expression

 

Antigen Expression

 

Gene Expression

 

Applications

 

 

 

 

收到常温细胞后如何处理?

 

(细胞培养详细操作步骤请参照邮件附件)

 

  • 首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与(所拍照片将作为后续服务依据)。
  • 75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养 2-4 小时,以便稳定细胞状态。
  • 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
  • 静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
  • 贴壁细胞:若细胞生长密度超过 80%,可正常传代;若未超过 80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留 5ml 左右继续培养,直至细胞密度达 80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
  • 悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至 50ml 无菌离心管内,1200rpm 离心 5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入 5ml 培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过 80%,可将细胞悬液分至 2 个细胞培养瓶内培养,补加培养基至 5ml;若细胞密度未超过 80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达 80%左右时再进行传代操作。

 

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