CHO-S仓鼠卵巢细胞价格

HL0006CHO-S仓鼠卵巢细胞价格

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具体成交价以合同协议为准
2015-11-09 14:25:13
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产品简介

我们提供的CHO-S仓鼠卵巢细胞,源自于成年中国仓鼠卵巢深入活体组织切片的CHO细胞。建议悬浮培养。
CHO-S仓鼠卵巢细胞增殖能力取决于细胞取材、培养技术、培养条件等综合因素。请按照正确的培养方法来解冻、传代,以此保证细胞具备良好的增殖能力,方便您的后继研究顺利进行。

详细介绍

本页描述的产品仅供科学实验研究使用,不用于临床,非医疗器械,不做其他用途。

CHO-S仓鼠卵巢细胞价格

规格:1×106个/管
培养基:CHO无动物源培养基
运输:干冰运输
保存:液氮保存

质量控制: 

本细胞经过了检测,不含有细菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体。 
培养条件:
37℃,8% CO2,PH值7.2~7.4,125rpm,无菌恒温培养。

用途: 
本产品只提供给进一步的科研使用,不可应用于治疗等其他方面。
细胞相关操作:

CHO-S仓鼠卵巢细胞价格
CHO-S细胞复苏
1.37°C水浴预热培养基(CHO细胞无血清培养基);
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min;
4.弃上清,加入5ml培养基重悬细胞,用血小球计数板进行细胞计数,按细胞密度6-7×105/ml接种到25ml无菌摇瓶中(带空气过滤通气孔的摇瓶);
5.摇瓶置于37°C,8% CO2培养箱中的摇瓶架上,125rpm培养。
CHO-S细胞传代
1.取细胞计数(详见CHO-S细胞冻存),当细胞密度达到1.0-3.0×106/ml时(不要超过3.0×106cells/ml),可传代;
2.37°C水浴预热培养基(CHO细胞无血清培养基);
3.在超净台中,加适量预热好的培养基到无菌摇瓶中,以细胞终密度为6-7×105/ml接种细胞(也可1000rpm,5min离心后弃上清,用预热好的培养基重悬并调整细胞密度为6-7×105/ml),转移到无菌摇瓶中;
4. 摇瓶置于37°C,8% CO2的培养箱中的摇瓶架上,125rpm培养。
注:CHO-S细胞对氧的要求较高,因此,悬浮培养必须具有高表面积体积比,否则细胞的生长会受到抑制。培养基的体积不能超过摇瓶的五分之二;即100毫升的摇瓶不能超过40ml培养基,250ml摇瓶不能超过100ml培养基。
CHO-S细胞冻存
1.细胞计数:
1)洗净晾干血小板计数板和盖玻片,将盖玻片*覆盖计数区
2)充分混匀细胞,取少量(0.1-0.5ml)细胞悬液与等体积的染色液台盼蓝混合,移液器吹吸混合均匀,用移液器取20ul混合液从盖玻片两端(与中间凹槽平行的两端)分别打入细胞,以细胞悬液刚好浸湿盖玻片为佳
3)显微镜下,数四个计数区的总细胞数,无活性细胞染成蓝色,活细胞不被染色
4)细胞密度=细胞总数/4×10000×2
这里10000是不变的,因为计数的细胞是在体积为1mm×1mm×0.1mm即10-4cm3计数池内,1cm3=1ml,将四个计数区的细胞数除以4取平均数,乘2是补偿加等体积台盼蓝形成的稀释。
5)细胞活性=活细胞数/细胞总数×100%
注:细胞密度高时,可调整细胞悬液和台盼蓝的比例,计数时乘以相应的稀释倍数即可。
2.当细胞密度达到传代密度且细胞活性在90%以上时,可以冻存细胞。
3.37°C水浴预热培养基(CHO细胞无血清培养基)。
4.在超净台中将要冻存的细胞移入离心管,1000rpm离心5min。
5.弃上清,用90%培养液+10%DMSO的混合液重悬细胞,并调整细胞密度为5-10×106/ml。
6.将细胞悬液分装到冻存管中(1-1.5ml/管)。
7.将装有细胞的冻存管放入程序降温冻存盒,-20°C放1-2h后,-80°C过YE,然后快速转移到液氮中。

CHO-S细胞贴壁培养
1.37°C水浴预热培养基(CHO细胞无血清培养基+10%FBS);
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min;
4.弃上清,加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中,轻轻晃匀;
5.置于37°C,8% CO2培养箱中培养;
6.4-6小时后,用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养;
7.每天观察细胞的状态和长势;
8.当细胞融合度达到90%以上时,给细胞传代;
9.在超净台中,弃培养基,加入2-5mlPBS清洗细胞后,再加入1ml胰酶消化细胞;
10.显微镜下观察到细胞变圆,有细胞开始脱离瓶壁时,加入5ml培养基(CHO细胞无血清培养基+10%FBS)终止消化;
11.用移液器轻轻吹下瓶壁上剩余的细胞,并轻轻吹打将细胞吹散;
12.将细胞移入离心管中,1000rpm离心5min;
13.弃上清,加入15-20ml的培养基(含血清)重悬细胞后转入T75培养瓶中或按适当比例传到T25瓶中(确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间),细胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶),混匀细胞悬液,确保细胞均匀分布;
14.将培养瓶置于37°C

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