胶原酶
时间：2020-06-05 阅读：1341
胶原酶
——动物组织消化利器
图1：胶原酶
产品介绍
胶原酶（Collagenase）是一类能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中），并切割该序列中的中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键的肽链内切酶，且能够水解结缔组织中的胶原蛋白。
许多蛋白酶都能水解单链和变性的胶原多肽，但胶原酶是唯——种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，其广泛存在结缔组织内，其中有效的胶原酶是由厌氧细菌溶组织梭菌（Clostridium histolyticum）分泌的“粗”胶原酶。
翊圣胶原酶来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶“粗”提物，不仅含有能够降解天然胶原和网状纤维的胶原酶，还含有其他的一些蛋白酶如多糖酶、脂酶等，能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白、多糖和脂质等，因此更适用于组织消化。
目前市面上的细菌胶原酶依据胶原酶的活性差异主要分为5种类型：胶原酶I型，II型，III型，IV型和V型等。
胶原酶的选择
产品名称 | 外观 | 酶活 | 应用范围 |
胶原酶I（Type I Collagenase） | 棕色或棕褐色结晶性粉末 | ≥125 U/mg solid | 包含（胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶）活性，用于上皮、肺，脂肪和肾上腺组织细胞的分离。 |
胶原酶II（Type II Collagenase） | 棕色或棕褐色结晶性粉末 | ≥125 U/mg solid | 含更多的梭菌蛋白酶活性，适用于肝脏，骨，甲状腺，心脏和唾液腺组织细胞的分离 |
胶原酶III（Type III Collagenase） | 棕色或棕褐色结晶性粉末 | ≥100 U/mg solid | 含低蛋白水解活性，对消化组织中连接部分较为有效，常用于哺乳动物组织细胞解离 |
胶原酶IV（Type IV Collagenase） | 棕色或棕褐色结晶性粉末 | ≥125 CDU/mg solid* | 含低胰酶活性，常用于胰岛和受体完整性的细胞制备 |
胶原酶V（Type V Collagenase） | 棕色或棕褐色结晶性粉末 | ≥125 CDU/mg solid* | 含至少7中蛋白酶成分，可用于胰腺小岛组织的分离，将结缔组织分离成单个细胞 |
*CDU = collagen digestion units
产品特性
1、消化效率高：溶组织梭菌的酶粗提物，对组织消化效率高。
2、依赖于活化剂：胶原酶需要借助二价阳离子如Ca2+、 Zn2+等活化酶的活性。
3、受抑制剂影响：胶原酶的抑制剂有EDTA 、EGTA等；二是重金属离子（Hg2+,Pb2+,Cd2+）；还有一些化学试剂如Cysteine、histidine、DTT、2-mercaptoethanol、o-phenanthroline等对胶原酶也有抑制作用。
4、耐干扰性强：胶原不会受到培养细胞所用的血清影响。
更具竞争力的价格
图2：价格对比图
FAQ
一、 使用方法：在Hank’s，Earle’s 或者其他平衡盐溶液中溶解，推荐使用工作浓度0.05 % ~0.5 % (w/v)
二、 存储温度： 2-8℃
三、 使用建议：
①对于胶原蛋白结构和生物合成研究，常使用更高纯度的胶原酶制剂，不含其他蛋白水解活性。
②对于组织解离，常使用粗制胶原酶制剂，例如弹性蛋白酶，胰蛋白酶或木瓜蛋白酶等。
四、常见问题：
1、实验过程中消化作用不佳
①如果是酶活不强或钙离子不足导致，应在低温干燥条件下储存胶原酶，胶原酶溶液分装后冻存
②如果是钙离子不足导致，应将胶原酶溶液中钙离子浓度设置为5mM。
2、使用过程中出现细胞死亡
①如果是蛋白酶过量，应减少蛋白酶接触时间或是加入白蛋白或灭活血清
②如果是pH 改变应使用缓冲液（如HBSS）；经常检查并重新调节pH
③如果氧气太少，应给消化液通无菌空气
3、实验中出现细胞受损
如果是蛋白酶过多导致，应减少蛋白酶用量或是加入白蛋白或灭活血清
订购信息
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
40507ES60 | Collagenase I 胶原酶I型 | 100mg | 279.00 |
40508ES60 | Collagenase II 胶原酶II型 | 100mg | 279.00 |
40509ES60 | Collagenase III 胶原酶III型 | 100mg | 528.00 |
40510ES60 | Collagenase IV胶原酶IV型 | 100mg | 279.00 |
40511ES60 | Collagenase V胶原酶V型 | 100mg | 528.00 |
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