产品推荐 | 细胞转染老兵：磷酸钙法细胞转染试剂！
时间：2024-10-15 阅读：109
基本原理
DNA与磷酸钙的结合
在含有磷酸盐的缓冲液（HBS）中，加入氯化钙（CaCl2）溶液和含有目的DNA的溶液。
DNA分子在生理pH条件下带负电荷，而磷酸钙带正电荷，通过静电作用，DNA与磷酸钙结合。
形成DNA-磷酸钙共沉淀物
细胞吸收共沉淀物
DNA进入细胞
DNA的表达
翌圣生物的磷酸钙法细胞转染试剂，基于传统方法优化，提高转染效率，减少细胞毒性，特别适合HEK293、293T和Hela等细胞系。适用于瞬时和稳定转染，即开即用，操作简便。
产品特点
性能稳定：可在2-8℃保存，有效期2年；
转染效率高：在293T细胞上阳性率高达95%；
毒性低：对细胞基本无毒，转染后不影响细胞正常生长。
结果展示
6孔板中，使用翌圣磷酸钙法细胞转染试剂在293T细胞上转染GFP质粒， 按照转染试剂说明书进行操作；转染48 h后，荧光倒置显微镜下观察并拍照。结果显示，翌圣磷酸钙法细胞转染试剂在293T细胞上的转染效率高达95%以上。
293T细胞（6孔板）
操作方法
按照60％左右的密度种植细胞入培养皿（瓶），细胞贴壁生长12-24小时后即可准备转染；
准备1.5 mL离心管，按照下表指示，依次加入DNA、HBS和CaCl2；
吹打3－5 次后均匀加到待转染细胞的培养液中，轻轻摇动培养皿（瓶）；
不同培养容器试剂使用量（仅供参考）
细胞培养试剂 | 6孔板 | T-25培养瓶 | 10 cm平皿 |
培养基（mL） | 2 | 5 | 10 |
DNA（μg） | 2 | 4 | 7.5 |
HBS（mL） | 0.2 | 0.5 | 1 |
CaCl2（μL） | 14 | 35 | 70 |
产品信息
产品名称 | 产品规格 | 产品货号 |
Hieff Trans®Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸钙法细胞转染试剂 | 200T | 40803ES70 |
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