Nissl Staining Solution 尼氏染色液

产品信息

产品描述

尼氏染色液是以德国的精神病学家和神经病理学家Franz Nissl的名字命名的，主要用于石蜡或冰冻切片神经元细胞浆

中的尼氏小体(Nissl body)染色。染色后呈蓝紫色，用于显示脑或脊髓的基本神经结构。Nissl小体大而数量多，说明神经细

胞合成蛋白质的功能较强；相反，在神经细胞受到损伤时，Nissl小体的数量会减少甚至消失。尼氏染色液的有效成分是Cresyl violet，该成分可以和RNA或DNA结合，也可以对粗面内质网上的核糖体以及细胞核染色。

运输与保存方法

室温运输。室温避光保存，至少1年有效。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）Nissl染色液的染色能力很强，并且染色后很难去除，请注意勿使染色液沾染皮肤和衣物等。

3）需自备4%多聚甲醛、无水乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片，需自备90%乙醇，无水乙醇及二甲苯。

4）样品数量较多时，可以用染色架和染色缸，便于操作。第—次使用本产品时建议先取1-2个样品进行预实验。

使用方法

一. 样本处理：

1）对于石蜡切片：

①二甲苯中脱蜡5-10 min，共三次。注：脱蜡不充分会导致染色不均匀；

②无水乙醇5 min；

③90%乙醇2 min；

④70%乙醇2 min；

⑤蒸馏水2 min。

2）对于冰冻切片：

①用4%多聚甲醛固定10 min以上。
②蒸馏水洗涤2 min。
③换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2 min。

3）对于培养细胞：

①用4%多聚甲醛固定10 min以上；

②蒸馏水洗涤2 min；

③换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2 min。

二. 染色步骤：

1）对上述处理好的样品，用尼氏染色液染色3-10 min (可以根据染色结果和要求调整时间，染色时温度提高到37-50 ℃对于25-50 μm等较厚的切片可以使染色更均匀）。

2）蒸馏水洗涤2次(每次数秒钟即可)。

3）95%乙醇洗涤约5 Sec。此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明及封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。

【注】：如果用于免疫组化等染色后的复染，可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行尼氏染色。

三. 脱水、透明、封片或进行其它染色

1) 脱水、透明、封片：

①95%乙醇脱水2 min；

②换用新鲜的95%乙醇再脱水2 min。

③二甲苯透明5 min。

④换用新鲜的二甲苯，再透明5 min。

⑤用中性树胶或其它封片剂封片。

⑥显微镜下观察，细胞呈现斑驳的蓝紫色染色。

2) 进行其它染色：

如果进行免疫荧光染色，或进行Hoechst等荧光染料的染色，在尼式染色液染色后：

①70％乙醇洗涤2次，每次2 min。

②PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5 min。

③即可进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。

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