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Click Chemistry 是一种新方法，可在温和的水性条件下使一对官能团相互快速选择性地反应（“点击”）。点击化学反应可以分为两个独立的组：（1）Cu（I）催化的叠氮化物-炔烃点击化学反应（CuAAC）；(2) 应变促进的叠氮化物-炔烃点击化学反应 (SPAAC)。
已经用 CLICK 部分（例如末端炔烃或叠氮化物）功能化的生物分子可以通过用兼容的 CLICKable 荧光染料（例如荧光叠氮化物或炔烃）进行标记来检测，该染料允许随后通过荧光光谱法进行可视化。ABP Biosciences 开发了一系列可点击的生物素和荧光染料，用于对生物分子进行有效的“点击”标记。

特征

高选择性、低背景标记
快速定量标记
用于多色成像的多种荧光团选择
Andy Fluor™ 染料可提供更明亮的信号

图 1.点击化学标签

标准 CuAAC 反应
叠氮化物和炔烃可以在标准 CuAAC 反应中互换使用，因此任何一种都可以用作标记底物或标记用于检测步骤。一些生物分子对用于催化标准点击反应的铜量敏感。特别是，诸如 GFP 和 R-PE 之类的蛋白质表现出降低的荧光，并且核酸可以在高铜环境中变性。

用于无铜反应的 DBCO 炔烃
DBCO 试剂可用于在不使用重金属催化的情况下与叠氮化物修饰的目标进行点击反应。DBCO 反应是活细胞表面标记的理想选择，还可以最大限度地减少对 GFP 或 R-PE 等荧光蛋白的损害。

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