2024第三季度Incucyte®国内成果大盘点
时间：2024-11-09 阅读：200
长时程活细胞成像Incucyte®是一款革命性的细胞成像设备，能够在培养箱内实现无限时间的连续观察。其傻瓜式的实验设置和分析流程，以及精准的细胞指标计算，使得众多用户对其爱不释手。Incucyte®在细胞水平的体外实验中有着广泛应用。
事实胜于雄辩，用文章数量说话！在2024年第三季度，陈老师下载了数十篇包含Incucyte®数据的国内文章（文献列表在文末哦！）。
表1. 2024 Q3 Incucyte®文章第一作者单位分布
从文章的分布单位来看，很多单位在一个季度内就发了多篇文章，例如澳门大学，滨州医学院以及电子科技大学等。利用Incucyte®，研究人员可以高效地获得实时的细胞信息，并快速地获得可信的研究成果。足以说明Incucyte®因其简单易用和短时间内生成多维精准数据，是发表高质量研究文章的利器！
表2. 2024 Q3的Incucyte®文章应用分布
Incucyte®应用非常广泛，从这些文章中可以看出，除了传统的细胞增殖活性和划痕迁移实验外，还有类器官、吞噬和内化等多种应用。
陈老师就选几篇比较典型的国内文章介绍一下
最新应用
类器官制备外泌体
北大三院[1]
唾液来源的外泌体可加速伤口修复，但由于口腔环境复杂，提取较为困难。作为一种可行的替代方案，本文建立了人类小唾液腺类器官（hMSG-ORG）来产生外泌体 （MsOrg-Exo）。在体外实验中，MsOrg-Exo 显著增强了细胞增殖、迁移和血管生成能力。MsOrg-Exo 促进伤口部位的增殖、血管生成和生长因子的分泌。Incucyte®用来追踪类器官的生长以及细胞的增殖情况。
图1. 连续跟踪单细胞生长。在第三天观察到直径约为 100 μm 的小球形腺泡状类器官的形成。随后，腺泡的面积逐渐增加，培养两周后直径达到 1-2 mm
为了验证 hMSG-ORGs 是否可以在体外模拟唾液腺功能，研究使用毒蕈碱受体激动剂卡巴胆、β受体激动剂异丙肾上腺素和非胆碱能肽神经递质VIP进行了功能性肿胀测定。Incucyte®结果显示，在给药后 2 小时内，hMSG-ORGs 中腺泡样结构显著肿胀，而用 DMSO 处理的 hMSG-ORG 未观察到显着变化，这表明 hMSG-ORGs 可以在体外对不同的神经递质刺激做出反应。
图2. Incucyte® 在 5 小时内以 2 分钟的间隔捕获类器官的明场图像
将 HUVEC、HaCaT 和 HSF 细胞以 3000个细胞/孔的密度接种，然后用MsOrg-Exo处理。在接下来的 500 小时内，使用 Incucyte® 系统每小时测量一次每个孔的细胞面积。
图3. 用 MsOrg-Exo 处理的 HUVEC、HaCaT 和 HSF 细胞的增殖测定，Incucyte® 在 36 小时内连续跟踪细胞生长区域 （N = 3），可见MsOrg-Exo可以促进细胞的增殖。
Incucyte®可以对类器官进行层扫拍摄，最快可以几分钟间隔拍摄。
最多数据
化疗耐药与FTO
盛京医院[2]
化疗耐药是神经母细胞瘤（NB）患者治疗失败的重要原因，直接影响患者的预后。本文研究了脂肪量和肥胖相关基因（FTO）在NB细胞对各种化疗药物的化疗敏感性中的作用。FTO过表达抑制细胞增殖，而FTO敲低促进NB细胞增殖。FTO的下调降低了NB细胞对紫杉醇的敏感性，而FTO的上调增强了其敏感性。此外，FTO表达较低和较高的患者对各种化疗药物或小分子抑制剂的敏感性不同。这一发现可能指导医生和患者选择合适的化疗药物或小分子抑制剂进行治疗。文中多数数据都是Incucyte®生成的！
图4. 左图为两种NB细胞系的生长曲线，中图为终点计算结果，右图为原始图（黄色为细胞识别）
两个实验组差别不大，但是Incucyte®对群体细胞增殖分析结果具有良好的重复性，可以判定微小差别实验组之间的显著性。
最高影响因子
巨噬细胞活化机制
首都医科大学[3]
人组蛋白macroH2A1.2整合到核小体中不会影响它们的稳定性或折叠动力学，但它显著阻碍了促进染色质转录（FACT）功能。本文发现FACT有效地降低了macroH2A1.2-核小体的稳定性，确定了macroH2A1.2 中的残基S139A突变是调节FACT在核小体维持功能的关键开关。S139A突变重塑macroH2A分布并影响刺激诱导的转录和巨噬细胞中的细胞反应。本文阐明了macroH2A1.2和FACT在核小体水平上错综复杂的相互作用机制，并阐明了它们在巨噬细胞转录调控和免疫反应中的作用。
图5. Incucyte®测试发现：将PE标记的磁珠和巨噬细胞混合，发现S139A突变后的巨噬细胞的吞噬能力减弱。15分钟拍摄一次，20倍镜，共拍摄360次。
拍摄360次，人工操作是不可能的呢！
Incucyte®长时程活细胞
成像系统应用文集
为了将Incucyte®推广到更多活细胞实验，我们致力于提供全面的应用解决方案。《Incucyte® 长时程活细胞成像系统应用文集》除了基础的细胞增殖和活性监测外(如细胞凋亡/周期/毒性等)，还涵盖了抗体内化、旁观者效应、共培养杀伤、炎症反应(NETosis)、细胞吞噬、划痕实验、细胞趋化、类器官研究、肿瘤球分析、神经突生长、 ATP 检测、线粒体膜电位、病毒/脂质体/外泌体监测、全孔成像等多个方面。应用范围广，是您寻找实验方法的有利工具。
为什么Incucyte®那么火热呢？
培养箱内无限时间的连续观察，最短几分钟间隔拍摄，减少人力，防止过多操作对细胞的伤害
6个板位，分别独立设置检测程序，可以兼容各种孔板和培养皿，通量高
高效简便的模块化软件设置和数据分析，输出图片、视频、生长曲线等多指标多参数
> 100种优化过的配套荧光试剂和耗材及详尽的protocol
一句话：放好您的细胞，其他交给Incucyte®吧！
-参考文献-
[1]GelMA loaded with exosomes from human minor salivary gland organoids enhances wound healing by inducing macrophage polarization | Journal of Nanobiotechnology (springer.com)
[2]Frontiers | FTO diversely influences sensitivity of neuroblastoma cells to various chemotherapeutic drugs (frontiersin.org)
[3]FACT mediates the depletion of macroH2A1.2 to expedite gene transcription: Molecular Cell