必看!超滤实用工具秘籍,助你脱离实验“天坑”
时间:2024-11-14 阅读:169
你是否也常常遇到这些超滤实验的困扰?
流速太慢:离心机从晚上9点“肝”到凌晨2点半,快要崩溃!
浓缩失败:心情糟糕,想哭,不是在做实验,就是在实验失败的路上。
过滤困难:离谱!PBS都滤不下来,严重耽误我的实验进度……
滤膜堵塞:谁懂啊,给蛋白换液,堵了两根超滤管还没搞完,一天白干?
蛋白损失:离心完蛋白漏的干干净净,真的栓Q,难道是我的福报?
说多了都是泪,好想拥有一支能力强,效果拔群的超滤管!
别急,让小赛来为你分忧解难。切记,在进行样品浓缩超滤之前,一定要做好正确的选型,并注意实验操作规范哦!
如何避开一个个超滤实验中的天坑,小赛准备了20页超长实用资料《实验室过滤解决方案和实用工具合集》,涵盖超滤选型和实用技巧,绝对是你实验室的得力助手!快来免费下载吧!
《实验室过滤解决方案和实用工具合集》
接下来,让我们看看超滤管有哪些常见的疑难困惑吧!
Q
如何根据我的样品体积,选择对应的超滤产品?
赛多利斯超滤产品家族,可实现从0.1mL-5L体积范围样品的超滤和透析,且可以使用离心,加压,加压离心,以及切向流过滤(TFF)的方式进行样品处理。
Q
不同的超滤方式有什么特点和区别呢?
Vivaspin® 超滤管
常用的是离心方式,过程温和,方便快速,可为大多数样品溶液提供浓缩过滤,用于纯化和浓缩蛋白质、核酸、病毒、大分子和纳米颗粒等
Vivaspin® 20和Vivaspin® 100超滤杯
可以在气体压力下运行,Vivaspin® 20也可以通过加压离心运行,两者相结合的处理时间通常比离心快30 %到50 %
Vivaflow® 切向流过滤膜包
能够快速处理大体积样品,减少滤膜堵塞,有效回收目标分子。可拓展性强,适用于浓缩、脱盐、澄清和分离等多种操作
Q
超滤膜材质多种多样,都适合我的样品吗,我该如何进行选择呢?
小赛推荐4种膜材质,分别是聚醚砜(PES)、再生纤维素(RC)、改良的再生纤维素(Hydrosart® RC)和三醋酸纤维素(CTA)供大家选择,如图所示,快点击打开看看它们各自的“看家本领”吧!
Q
我目前做的是XXX样品,有对应的超滤管供选择吗?
当然啦!赛多利斯的膜材质和孔径十分齐全,在选型正确的前提下,可以确保任何生物分子的最大回收率哦!
Q
如何选择最佳的截留分子量(MWCO)呢?
一般的选择原则是1/3;如果优先考虑截留率,可选择更小MWCO,如1/6;
如果优先考虑流速,可选择更大MWCO,如1/2。注意,不同品牌的截留分子量MWCO略有差异,不可简单照搬哦!
Q
我的样品是核酸,如何把单位bp换算成对应的截留分子量KDa呢?
MWCO截留分子量与nm纳米 / bp值的换算关系如图所示。
Q
超滤管使用过程中,对于离心机的摆放有什么要求?
超滤过程中,请注意离心力一定不要作用在膜上,水平转子或角转子的要求也不一样哦,详情请看图示。
Q
使用不同超滤管时的离心力如何设置? 最大处理体积分别是多少?
做实验时需要调整离心力在超滤膜的承受范围内,如果转速太高,可能导致膜破裂。建议在超滤管中加入样品时不要超过最大体积,以Vivaspin® Turbo 15为例,若使用水平转子,样品不得超过15mL,若使用角转子则不超过9mL。
另外,建议核酸样品的离心力比蛋白样品离心力低一半左右。而如果是线性分子,在低的离心力条件下可以获得更好的浓缩效果哦!
让我们一起告别超滤实验的困扰,迎接更加顺利的实验之旅!
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