分子互作强不强？Octet®说了算！
时间：2024-12-04 阅读：73
赛多利斯的Octet®非标记分子互作仪因其非标记检测技术，提供了更真实的结果，并能够获得结合动力学数据，使分子互作的分析更定量化。在国内外广泛应用，成为分子互作检测的主流设备之一，也是生命科学分子机制研究和药物研发的必备工具。
目前文献总数>16,000篇，仅一个季度内，国内就有超100篇文献发表，其中包含多篇CNS级别的文章。
2024年第四季度尚未过半，已有多篇使用Octet®的国内CNS文章涌现！以下这两篇文章借助分子之间的模块化组合分别形成了靶向嵌合体和病毒受体，含有大量的Octet®数据，陈老师将为大家详细解读。
北京大学化学与分子工程学院
Cell【1】
尽管免疫疗法彻底改变了癌症治疗，但其疗效仍然受到高度复杂性和异质性的肿瘤免疫微环境（TIME）的影响。本文报道了一个多模式可编程平台，该平台能够将多个治疗模块集成到单个药物中，以便在TIME内实现多个免疫细胞共同参与肿瘤靶向。该平台基于三重正交接臂（T-Linker）技术和纳米抗体（nanobody）模块，将各种治疗性小分子和生物分子整合为多模式靶向嵌合体（Multi-modal Targeting Chimeras，Multi-TAC）。纳米抗体分子量小，有利于穿透实体瘤。将肿瘤细胞表面的EGFR、T细胞表面的CD3以及树突状细胞（DC）表面的PD-L1的纳米抗体融合在一起，构建了EGFR-CD3-PDL1 Multi-TAC（后面简称ECPMT），以实现T细胞和DC细胞同时参与对肿瘤的靶向结合。在几种人源化小鼠模型和患者来源的肿瘤模型中表现出优异的疗效。Multi-TAC 具有高度模块化和可编程的特点，可在免疫治疗及其他领域得到广泛应用。
表1. Octet®亲和力测试：使用链霉亲和素传感器（Sartorius. 18-5020)，固化生物素化的CD3，PDL1,EGFR，检测与ECPMT，以及单个纳米抗体的亲和力。结果说明单个纳米抗体融合成ECPMT后，亲和力未发现明显变化。
图2. Octet®多位点结合实验：将EGFR固化在传感器上，结合ECPMT后，再依次结合PDL1,CD3，发现ECPMT可以同时结合CD3,PDL1,EGFR(深红色)
武汉大学生命科学学院
Nature【2】
不同冠状病毒有着不同的受体，但是很多受体是未知的，无法建立病毒的感染模型。本文建立了一种定制化病毒受体（Customized Viral Receptors，CVR）,由各种模块化人工受体支架生成的病毒结合结构域组成。生成了来自6个亚属的12种代表性冠状病毒CVR（基于纳米抗体），并表达在细胞上，其中这些冠状病毒大多数缺乏已知的受体。CVR和病毒配体分子之间的亲和力测试都是Octet®完成的。
表达CVR的细胞可以使得冠状病毒HKU3的假病毒和RsHuB2019A的真病毒繁殖。用HKU5特异性CVR，成功从蝙蝠样本中分离出HKU5菌株。这个研究证明了CVR策略在建立天然受体非依赖性感染模型方面的潜力，为缺乏已知易感靶细胞的病毒感染机制研究以及抗病毒药物研发提供了一种工具。
图3. Octet®检测CRV/RBD与纳米抗体之间的结合动力学：将病毒配体固定在ProA生物传感器上 （Sartorius，18-5010），与两倍连续稀释的纳米抗体进行结合解离。上图为原始结合解离曲线，下图为计算的结合动力学结果。
Octet®检测的配体受体的亲和力，往往和生物学活性有着良好的相关性。
生命科学中的分子机制研究本质上就是分子的互作，而Octet®分子互作仪能够非标记的提供Kon，Koff等分子结合动力学数据，为分子互作提供更定量化和准确的证据。Octet®可以检测小分子，DNA/RNA，蛋白质，病毒以及细胞等多种物质。从这两篇文章Octet®数据量可以看出，分子互作的强弱与存在与否？Octet®都能给出明确答案！还犹豫什么，赶快使用Octet®检测分子互作，发高质量文章吧！
-参考文献-
【1】Multimodal targeting chimeras enable integrated immunotherapy leveraging tumor-immune microenvironment - ScienceDirect
【2】Design of customized coronavirus receptors | Nature