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大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b试剂盒
英文名称:RatTRAP Assay Kit
货号:SB-TR102
【预期用途】
RatTRAPTM test是一种用来测定大鼠血样中来源于破骨细胞的抗酒石酸性磷酸酶5b(TRAP5b)的固相酶联免疫活性测定。
RatTRAPTM test只供科研使用。
【概要说明】
TRAP是破骨细胞骨吸收中表达并被释放进入血循环。因此,血清TRAP被认为是有效测定骨吸收速率的潜在标记物。然而,一些问题阻止了特异性TRAP分析的发展,包括血清中一些其它酸性磷酸酶,两种TRACP的异构重组产物——5a和5b,活跃或不活跃的TRAP分子及循环中一些碎片的干扰。
RatTRAP™分析方法是一个特异性检测大鼠破骨细胞分泌到循环中的TRAP 5b。并且,RatTRAP™只检测刚进入循环之内有活性的TRAP分子。该方法不会检测到在循环中没有活性的TRAP分子或碎片。因此,RatTRAP™分析方法能准确评估在样本采集时的骨吸收速率的数量。
【应用】
RatTRAP™分析能用于监测睾丸切除术和卵巢切除术后大鼠模型的骨吸收速率的改变。然而,该分析方法的使用存在着一些限制。我们推荐在手术操作前提取血清样本(日子0,基准样本,非常重要),在手术操作后的1,2,4,7 和 14 天提取血清样本。在每个时间点都必须包括一个假设群体作为正常水平组。我们的结果出示血清TRAP 5b水平在睾丸切除术和卵巢切除术之后的几天内快速上升, 然后在手术后2个星期又回重到正常的水平。在那个时间点之后,TRAP 5b水平不再高于正常值。
【原理】
RatTRAP™使用一个高特异性的单克隆抗体是以重组巴氏病毒激发的RatTRAP作为抗原产生的。在测试中,抗体在包被有抗鼠IgG的单克隆抗体微量孔中孵育。洗涤之后,标准品,质控品和血清样本在微量孔孵育,并且测定TRAP 5b活性是在TRAP 5a失活而TRAP 5b高活性时的PH下,利用发光底物酶显色。反应被终止,反应混合物的吸光度在微量板读数仪上读取,颜色的亮度与样本中TRACP 5b的活性和数量成正比。