细胞侵袭

服务目的：

研究趋化因子或其他营养物质对细胞侵袭的影响
服务原理：

将细胞种于上室，趋化因子等种于下室，细胞会向营养成分高的下室跑。与迁移实验不同是侵袭实验需要在小室聚碳酸酯膜上铺设一层基质胶。用以模仿体内细胞外基质，细胞欲进入下室，先要分泌基质金属蛋白酶（MMPs）将基质胶降解，方可通过聚碳酸酯膜。计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的侵袭能力。

客户提供：

1.提供检测样本的样本信息、检测应用及检测时间点等；

2.若客户提供细胞：25T细胞培养瓶，灌满培养基新鲜运输或提供细胞冻存管，干冰运输

服务流程：

1. matrigel在4℃过夜融化
   2. 稀释matrigel至终浓度1mg/ml
   3. 在chamber上室底部中央垂直加入稀释后的matrigel。37℃温育4-5 h
   4. 所有细胞培养试剂和Transwell chamber放在37℃恒温水浴箱温育
   5. 消化培养至对数期的细胞，用无血清培养基悬浮细胞，计数，调整浓度为5*10⁵/ml
   6. 在下室加入含20%血清的培养基。上室加入细胞悬液，37 ℃、5％CO²、饱和湿度条件下继续培养24 h
   7. 取出chamber，吸干上室液体，移到预先加入甲醇的孔中，室温固定30min
   8. 取出chamber，吸干上室固定液，移到预先加入结晶紫染液的孔中，室温染色            15-30min；用PBS冲洗浸泡数次，取chamber，先用干棉签将上室内液体吸去，再用棉签轻轻擦Matrigel凝胶和聚碳酯膜上表面的细胞
   9. 揭下膜表面上的细胞，晾干，封片
   10. 显微镜下计数，统计结果；（若不用保存底膜，可省去步骤9）

收费标准/服务周期/提供结果：
详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。

【本公司合作项目】
慢病毒，腺病毒，RNAi类，分子生物实验，病理实验，免疫学实验，细胞实验，动物实验，蛋白组学实验等，能够进行药效学评价、毒理学评价、细胞药筛、动物建模、病理检测、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析服务！

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