第三代免疫分析技术,多因子检测金标准,电化学发光原理,可应用于细胞因子、信号通路磷酸化蛋白、疾病biomarker检测,可应用于药物筛选、PK研究、免疫原性检测、毒理评估、抗体药亲和力筛选等。

蛋白分析实验技术

1、MSD超敏电化学发光平台

针对550位北美和欧洲的高级生物医药研究人员的报告中显示,基于电化学发光技术的MSD(MesoScale Discovery)是受欢迎的5大免疫分析品牌之一。可将Western Blot从16小时缩短至4.5小时。

基本原理:

电化学发光是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,是电化学和化学发光两个过程的结合。MSD电化学发光检测技术使用SULFO-TAGTM标记物,在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的电极表面通电后,电化学作用激发SULFO-TAGTM标记物发出强光。

MSD(Meso Scale Discovery)优势:

1)更高灵敏度与更宽的线性范围

MSD灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6log(从亚皮克级到几万皮克),能同时兼顾高低丰度蛋白的检测。传统 ELISA常规线性范围在10pg/ml-1000pg/ml,采用Ultra-sensitivity试剂盒则为0.5-10pg/ml。(对比详情见下图)

2)样本兼容度高,基质效应小

MSD平台由于其*的电化学发光原理,可将许多非特异信号予以排除,受样本性质的影响更小(如粘稠样本,悬浊颗粒样 本等),因此对于各类生物学样本的兼容度高。目前测定样本包括但不限于:血清,血浆,培养上清,细胞/组织裂解液,脑脊 液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物学样本。

3)节省样本用量,可实现多重检测

传统ELISA每孔所需样本量一般为50-100uloMSD通过点阵技术,在96孔石墨电极板里,可实现每孔25卩L样本,10个指标的 检测,为珍贵样本的研究提供了更多的数据。

4)实验流程简便、快速、多元化

MSD提供了更为便捷快速的实验流程,通常只需4-5小时,即可完成整个检测流程,简要步骤如下:

4.1V-PLEX

4.2 U-PLEX

5)信号稳定且不受显色顺序影响

MSD由于基于电化学发光原理,信号分子SULFO-TAG需在电激发的情况下才能产生信号,因此整个实验流程无需避光,每 孔激发与信号采集时长统一,避免了像ELISA底物与终止液加入顺序先后所导致的数据差异,不受操作人员技术水平差异 的影响。请见下图电化学发光平台示意图(见后页)

应用范围

结果展示

MSD开发试验

项目

条件摸索

完成标准曲线摸索和样本初步检测

完成方法学检测

包含内容

A、捕获抗体、检测抗体、标准品、二抗条件摸索

B、标准曲线摸索和初步样本测试

C、方法学验证(整体重复3次)