NK-92细胞，ATCC细胞，培养技术；NK-92悬浮细胞  在培养的过程中会聚团  有少量贴壁   但是贴壁很轻微  不需要胰酶消化只要枪头轻轻吹打即可以从壁上下来。慧颖细胞库引进ATCC细胞库，状态良好，传代次数少，提醒各位老师，这个细胞确实难养哦。

NK-92细胞，ATCC细胞，培养技术

 一．产品简介

1、产品名称：NK-92

2、产品规格：25cm²培养瓶

3、培养基信息：

*培养基：

75%α-MEM( 成分：无核糖核苷、去脱氧核糖核苷， Gbico 货号：12561-056）+12.5%热灭活马血清+12.5%进口FBS+1%P/S+0.2mM 肌醇+0.02mM 叶酸+0.1mM β-Mer+100-200U/ml IL-2

4、 培养条件： 37℃，5%CO₂细胞培养箱中培养

5、冻存条件：α-MEM+40% FBS+10%DMSO

二． 使用方法

1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：

    取出25cm²培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，放入37℃，5%CO₂细胞培养箱中静置4-6小时或隔夜，以稳定细胞状态。然后，用75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，收集瓶内液体于50ml离心管中，1000rpm离心5min，弃上清，用6ml*培养基重悬，全部接种到25cm²培养瓶中，再放入37℃，5%CO₂细胞培养箱中培养。如果离心后细胞量很多，可以直接1:2分瓶培养。

2、细胞传代：

     细胞生长至覆盖培养瓶的85%及以上面积时，收集瓶内液体于15ml离心管中，1000rpm离5min，弃上清，用12ml*培养基重悬细胞，按1:2的比例进行接种传代，接种到25cm²培养瓶中，放入37℃，5%CO₂细胞培养箱中培养，2-3天更换培养液。换液的步骤同细胞NK-92细胞，ATCC细胞，培养技术传代步骤。

3、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的85%及以上面积时，收集瓶内液体于15ml离心管中，1000rpm离心5min，弃上清，用适当量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=5:4:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

2）先将细胞冻存管放置于4℃ 0.5h，再放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃隔夜，24h后可转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；

2）将冻存管中的细胞移至含有5ml*培养液的15ml离心管中，然后1000rpm/min，离心5min；

3）弃上清，沉淀细胞用6ml*培养基重悬，接种到培养瓶中，zui后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）第二天，换用新鲜*培养基继续培养。

三． 注意事项

1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月；

2、在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；

3、传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态；

4、如果您的实验时间较长， 请在收到细胞后传代时，按细胞量分种2瓶，使用其中的一瓶细胞实验，其余的细胞先冻存起来。下次实验需要时，再复苏；

5、该NK-92细胞，ATCC细胞，培养技术只可用于科研。

6、需要更多信息，请致电： ！