产品英文名称：Vero Cell HCP ELISA kit
产品中文名称：Vero 细胞宿主蛋白免疫检测试剂盒

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Vero Cell HCP ELISA kit产品介绍：
病毒疫苗或其它治疗用蛋白在Vero细胞中表达是商业用大量生产药物原料产品的经济简便方法。Vero Cell HCP ELISA试剂盒开发使用了不同终端产品和中试样品，４种不同疫苗产品是从疫苗生产商获得，包括全病毒疫苗和重组蛋白。Vero Cell HCP ELISA使用具有广泛反应性，强吸附性的多克隆抗体，可以鉴定出所有Vero细胞系中高度保守的HCP。产品灵敏性强（zui低检测浓度达 0.7ng/mL）和具有高度特异性，可以应用于任何在Vero细胞中表达的蛋白产物。

§检测原理：Vero Cell检测是一个双位点酶联免疫检测。样本中包含的Vero Cell HCPs蛋白与标记有抗- Vero Cell抗体的辣根过氧化物酶同时反应，反应发生在之前涂有一层吸附性抗- Vero Cell蛋白抗体的微量滴定板中进行。免疫反构成为夹层式结构：固相抗休-HCP-酶标记抗体。反应结束后清洗微量滴定板去除未结合反应物。添加TMB作 用底物反应。微量滴定板读数器上测定水解物浓度，水解物浓度与Vero Cell HCPs蛋白浓度成比例。用提供的标准液绘制标准曲线，根据读数可以计算出Vero Cell HCPs蛋白含量。

§检测过程：取出所有试 剂平衡到室温→分别移取50µl标准液，对照物和样品至待测孔→移取100µl anti- Vero Cell:HRP(#F501)至每孔→密封滴定板，摇床室温温育2小时，180rpm→清空小孔，用纸吸干残留液，350µl清洗缓冲液清洗4次→加 100µl TMB 作用物(#F005)→室温静置30分钟，不需摇床→加100µl反应终止液(#F006)→分光光度计450/650nm读数

§结果分析：标准液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL)可用于制作标准曲线，标准液浓度相当于免疫反应HCP总浓度。根据测定的小孔中标准液吸光值绘制标准曲线。数据分析可以使用计算机选配曲线，例如点到点，三次样本函数，或四参数逻辑曲线。不要使用线性回归分析修改样品吸光值，这样会出现显著误差。也可以手工绘图，Y轴标注吸光值，X轴标注浓度。然后根据样品吸光值计算出样品中HCP浓度。（操作时每一浓度标准液都要滴定到两个小孔中，以便计算平均分光光度值，样品也需计算平均吸光值）。

Vero Cell HCP ELISA组成成份：
● Anti- Vero Cell:HRP(辣根过氧化物酶标记)　          1x12mL   F501(Product#)
● Anti- Vero Cell coated微量滴定板　                       12x8孔　  F502
● Vero Cell HCP标准液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL)   1mL/瓶　 F503
● Stop Solution终止液(0.5N硫磺酸)  　　　             1x12mL　 F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基联苯氨)　                             1x12mL　 F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍浓缩)　                   1x50mL   F004

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