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产品名称:红细胞裂解液(无菌)
英文名称:Red Blood Cell Lysis Buffer、ACK Lysis Buffer
关键词:去除红细胞、细胞的分离纯化
产品编号:R1010
详细介绍:
R1010-100 100ml 80.00
R1010-500 500ml 240.00
红细胞裂解液是一种去除红细胞简答易行的方法,即用裂解液裂解红细胞,既不损伤有核细胞又能*去除红细胞,红细胞裂解液裂解是一种比较温和的去除红细胞方法,红细胞裂解液主要用于经酶消化分散的的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化及组织细胞蛋白及核酸提取等试验中去除红细胞,经红细胞裂解液处理的组织细胞中不含红细胞,可进一步用于原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸和蛋白的分离和提取等。本红细胞裂解液是经无菌处理,利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理来裂解无核红细胞的。
使用说明:
1. 1倍体积的新鲜全血,加入3倍体积的红细胞裂解液。如1ml新鲜全血加入3ml红细胞裂解液,轻轻涡旋或颠倒混匀。
2. 冰上放置15分钟,其间轻轻涡旋混匀两次,红细胞裂解后,溶液应该是清亮透明的。
3. 收集细胞:4℃,450×g离心10分钟以沉淀白细胞,小心吸弃上清液。
4. 向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液,轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液为1ml,则加入2ml的红细胞裂解液。
5. 4℃,450×g离心10分钟沉淀白细胞,小心并*吸去上清液。
6. 重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,好于此步开始使用DEPC水配制的溶液进行操作。
(组织细胞处理:新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液,其余同上。)
注意事项:
样品要求新鲜,建议血液等现采现做;在第二次裂解的时候,一定要将细胞充分悬起混匀,只要细胞分散充分,一般情况下都会裂解比较*。个别情况:如果样品中含有有核红细胞,则裂解不*。例如鸟或禽类的红细胞。本红细胞裂解液经过无菌处理,使用时请保持无菌操作。红细胞裂解液要求4℃保存。
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