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DEAE-Sephadex A-50
柱层析纯化免疫球蛋白原理
DEAE-sephadexA-50
柱层析是离子交换层析的一种。
(四) 注意事项
1.柱的选择:从理论上说,只要柱足够长,就得获得理想的分辨率,但由于层析柱流速同压力梯度有关,柱长增加使流速减慢,峰变宽,分辨率降低。柱的直径增加,使液体流动的不均匀性增加,分辨率明显下降。
2.纯化过程必须严格控制脱缓冲液的PH及离子强度。样品与A-50凝胶必须用洗脱缓冲液*平衡后,才能进行柱层析。
3.所装的柱床必须表面平整,无沟流及气泡,否则应重装。
4.洗脱过程中应严格控制流速,且勿过快。
5.上样的体积要小,浓度不宜过高。
6.加样及整个洗脱过程中,严防柱面变干。