改良油红O染色液

改良油红 O 染色液
货号：G1261
有效期：6 个月有效。

产品说明：
产品名称 2×50ml 2×100ml Storage
试 剂 (A) ： 改
良 Oil red O stain
A1: Oil red O stain A 30ml 60ml 4℃ 避光
A2: Oil red O stain B 20ml 40ml RT
临用前，按 A1:A2=3:2 比例混合，静置 10min， 即获得改良 Oil red O Stain，不宜提前配制。
试剂(B): Mayer 苏木素染色液 50ml 100ml 4℃ 避光

产品说明：
脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机溶剂(例如乙醇、乙mi等)。人体的脂肪主要有两种：1、储存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪，如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等)，主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类，呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一，在氧化时释放出能量。
中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑 B、油红 O 法等。传统方法中，常采用苏丹染料，近发现偶氮染料油红 O 更适合脂肪的染色。油红 O 是很强的脂溶剂和染脂剂，较易与甘油三脂结合呈小脂滴状），与磷脂结合力稍差。其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在冰冻切片内脂质的溶解度较在原溶剂中的溶解度更大，所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。
改良油红 O 染色液主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着，常发生于肝、肾、心等实质脏器的脂肪变性，细胞内出现多数中性脂肪滴；鉴别和诊断脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质。标本不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用 10%的福尔马林)、也不采用石蜡切片，需用冰冻切片或碳蜡切片。脂肪的阳性染色结果呈橘黄红色，但具体颜色因脂质浓度而定。

自备材料：
1. 60%的异丙醇
2. 蒸馏水
3. 1%的盐酸溶液
4. 稀碳酸锂溶液
5. 甘油明胶或阿拉伯糖胶

操作步骤（仅供参考）：
1、 冰冻切片厚度 6～10µm，不固定或 10%福尔马林固定 10min 后水洗。
2、 切片入蒸馏水中稍冲洗。
3、 切片入 60%的异丙醇内浸洗 20～30s。
4、 切片入改良油红 O 染色液中(加盖)，密闭染色 10～15min。
5、 分色：入 60%的异丙醇内稍洗以便去除染液。
6、 入蒸馏水中稍微清洗。
7、 Mayer 苏木素染色液复染核 1～2min。
8、 (可选)1%的盐酸溶液稍微分化一下。
9、 (可选)自来水漂洗 10min 或稀碳酸锂溶液中促蓝。
10、 入蒸馏水中稍微清洗。
11、 用滤纸吸干周围水分。
12、 甘油明胶或阿拉伯糖胶封固。

染色结果：
中性脂肪 橙红色或橘红色
细胞核 蓝色

注意事项：
1、 改良油红 O 染色液不够稳定，易产生沉淀，不宜提前配制。
2、 如果 60%的异丙醇不易获得，亦可采用 70%的乙醇。
3、 由于脂肪易溶于有机溶剂，所以显示脂肪一般不能像石蜡切片一样处理，而通过冰冻切片染色来显示。
4、 作脂肪染色的冰冻切片不可太薄，过薄的切片常会使脂质丢失。
5、 Mayer 苏木素染色液复染时间不能过长。
6、 染色结果不能长期保存，应尽快观察及照相。
7、 甘油明胶封固的样本，保存时间不长。如需长期保存，可以在盖玻片与载玻片交界的边缘用中性树胶封闭。
8、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关文献：

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