Z0020  引物合成2-OD  索莱宝自产 

引物合成是通过测定引物的OD值，溶解引物，终合成引物的一个完善的过程。

目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。亚磷酰胺三酯法合成DNA的片段，具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的，合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的，相邻的核苷酸通过3′→5′磷酸二酯键连接。

引物合成特点

1.引物合成的纯度高。

2.合成的序列长。

3.合成的效果好。

引物纯化方式

1.C18柱脱盐：有人称其为简易反相柱，它对DNA有特异性的吸附，可以被有机溶解洗脱，但不会被水洗脱，所以能有效地去除盐分。它不能有效去除比目的片段短的小片段。这种方法一般不会对普通PCR反应产生影响。对于需要用于测序、克隆的引物不能使用这个。

2.OPC纯化： OPC纯化是根据DNA保护基（DMTr基）和Cartridge柱中树脂间的亲合力作用的原理进行纯化目的DNA的片段。

3.PAGE纯：PAGE纯化法是使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，对DNA的片段进行分离，然后从凝胶中回收目的DNA的方法。PAGE纯化法也是一种非常有效的DNA纯化方法，纯化后的DNA纯度大于95%，对长链Oligo DNA (大于50mer)的纯化特别有效。

4.HPLC纯化：HPLC纯化是使用高效液相色谱的原理，对DNA的片段进行纯化。纯度可以大于99%。主要用于短链和修饰引物的纯化。

5引物的OD数的定量

用紫外分光光度计，波长260nm，石英比色杯，光程为1厘米，测定溶液的光密度。测定时溶液的光密度好稀释到0.2-1.0之间。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后，用1ml水稀释测OD值。需要根据稀释倍数换算出母液的OD值。