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植物类黄酮含量检测试剂盒
产品内容:提取液:60%乙醇,自备。试剂一:液体3mL×1瓶,4℃保存。试剂二:液体3mL×1瓶,4℃保存。试剂三:液体20mL×1瓶,4℃保存。
产品说明:类黄酮是一类多苯化合物,属于植物次生代谢物,对人体具有消炎,抗菌,降血脂,清除体内羟自由基,预防癌症等作用。在碱性亚硝酸盐溶液中,类黄酮与铝离子形成在502nm处有特征吸收峰的红色络合物,测定样品提取液在502nm处的吸光值,即可计算样品类黄酮含量。
自备实验用品及仪器天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
植物类黄酮含量检测试剂盒
操作步骤:
一、类黄酮提取将样本烘干恒重,粉碎,过 40 目筛之后,称取约 0.1g,加入 2.5mL 提取液,用超声提取法进行提取,超声功率 300W,破碎 5s,间歇 8s,60℃,提取 30min。10000g,25℃,离心 10min,取上清,用提取液定容 2.5mL,待测。
二、测定操作表对照管 测定管样本待测液(μL) 200 200 试剂一(μL) 50 50 混匀,25℃静置5min 试剂二(μL) 50 混匀,25℃静置5min 试剂三(μL) 400 400 60%乙醇(μL) 350 350 混匀,25℃静置15 min,对照管调零,1mL玻璃比色皿,测定A502。
三、 类黄酮含量计算公式
标准曲线:y = 6.2096x+0.0008,R2 = 0.9996 类黄酮含量(mg/g)=(A502-0.0008)÷6.2096×V反总÷(V样÷V样总×W)= 2.013×A502÷W V样总:加入提取液体积,2.5mL; V反总:反应总体积,1mL;V样:反应中样品体积,0.2mL; W:样品质量,g
注意事项: 1、 吸光值大于0.8,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。 2、 显色完成后立即测定,2小时后吸光值会下降。 3、 检出限为12.8μg/g。