基因工程试剂JM109感受态细胞
货号：C1300
规格：10×100ul / 20×100ul
保存：-70℃保存，运输为干冰包装。自收货之日起液氮保存少一年，-70℃保存少 6 个月。

产品简介：
    本公司生产的JM109 感受态细胞是采用大肠杆菌JM109 菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19 质粒检测，转化效率可达 10 8 ，-70℃保存几个月转化效率不发生改变。
    基因型：recA supE44 endA1 hsdR17 gyrA96relA1 thi Δ(lac-proAB) F’[traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15]
    特 点：一种琥珀抑制型 F’重组缺陷菌株。支持 M13 噬菌体载体的生长，对转染的 DNA 有修饰作用，但无限制作用。该菌株中的 F’带有 lacZΔM15，后者使得与在 λZAP 中编码的 β-半乳糖 苷酶氨基端进行 α-互补，可用于蓝白斑筛选。

操作方法：（以下各步骤均为无菌操作）

1、将感受态细胞置于冰上融化，以下实验以 100ul 感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的 DNA，注意目的 DNA 的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一，轻轻旋转离心管以混匀内容物，冰浴放置 30 分钟。
3、将离心管置于 42℃水浴中放置 60-90 秒，然后快速转移到冰浴中放置 2-3 分钟，注意不要摇动离心管。
4、向离心管中加入 500ul 无菌无抗的 SOC 或 LB 培养基，37℃ 180rpm 振荡培养 1 小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的 SOC 或 LB 平板，37℃倒置培养 12-16 小时。涂布用量可根据具体实验来调整，如转化的 DNA 总量较多，可取 100ul 左右转化产物涂板；反之，如果转化的 DNA总量较少，可取 200-300ul 的转化产物涂板。过多菌液可以抑制细菌生长。如果预计的克隆较少，可通过离心后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可 4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的平板。
 

注意事项：

1、收到感受态细胞应保存在-70℃，不可反复冻融，否则其转化效率将会降低。
2、实验过程中应严格无菌操作，防止其它 DNA 的污染，避免为以后的筛选、鉴定带来影响。
3、转化时，转化效率与外源 DNA 的浓度在一定范围内成正比，但当加入的外源 DNA 量过多或体积过大
反而会降低转化效率。转化时 DNA 体积要小于感受态细胞体积的十分之一。
4、转化率的计算：转化率＝产生菌落的总数/铺板 DNA 总量
5、为防止转化实验不成功，可以保留部分连接产物，以重新转化，将损失将到低。

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运输说明：

1、极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入索莱宝的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
2、低温产品：低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入索莱宝的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
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