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双组分TMB显色液
产品简介:
目前酶免疫分析(EIA)技术,已被广泛应用于抗原,半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶,由于3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)在HRP的显色反应体系中,比其它色原具有更高的灵敏度且无致癌性而被广泛应用。TMB主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫斑点杂交或者免疫组化以及氯和过氧化氢的检测分析。为了满足不同的试剂盒产品研发与生产以及科研需求,本公司专门研制了针对不同类型的基于HRP的免疫分析用TMB显色液。
外观与结构:显色液A应为无色或淡黄色透明液体,显色液B应为无色透明液体。均无沉淀、颗粒及絮状物。
用于酶联免疫实验中的显色阶段:可于样本反应,生成深蓝色产物。
双组分TMB显色液 使用方法:
加液:待样品孔中加完HRP结合物并孵育一定时间后,用适当洗涤液洗板3-5次,每孔加底物显色液A、显色液B各50ul(A、B液先混合再加入孔中),轻轻混匀,根据个人实验需要,在室温(15-25℃)或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间,直显色预期深浅。
终止:每孔加入等体积的1M 盐酸或硫酸溶液终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。
读数:终止反应后15分钟内在450nm处测定各孔溶液的吸光值。
对照:空白对照不加HRP标记的抗体/抗原和阴性对照结果应无色。阳性对照及加HRP标记的抗体/抗原产生深蓝色产物。
注意:如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数;或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。
注意事项:
1、实验用品应该专一,避免交叉污染。
2、TMB对人体有刺激性,请注意适当防护。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
参考文献:
《Improved Antitumor Efficacy of Combined Vaccine Based on the Induced HUVECs and DC-CT26 Against Colorectal Carcinoma》 作者:Qiushuang Zhang ,Chao Xie , Dongyu Wang ,Yi Yang, Hangfan Liu , Kangdong Liu , Jimin Zhao , Xinhuan Chen, Xiaoyan Zhang ,Wanjing Yang ,Xiang Li ,Fang Tian , Ziming Dong and Jing Lu 期刊:Cells 影响因子:5.656 PMID:30767782