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一、弓形虫试剂盒用途及检测方法简述
弓形虫病(ToxopLasmosis)由细胞内寄生的刚地弓形虫引起,患者可能由食用污染的肉食或接触含有卵囊的猫粪而得病。病原体可通过胎盘感染胎儿,导致先天性弓型虫病,引起胎儿死亡或畸形。酶联免疫检测弓形虫特异性抗体IgG,是鉴定弓形虫病准确的血清学方法。
把纯化了的弓形虫抗原包被在微孔表面,加入经稀释的患者血清样品,若其中存在弓形虫IgG抗体,它便与包被的抗原结合成为抗原一抗体复合物。用水洗去未结合物后加入底物和显色剂,所产生颜色的强度与样品中的抗体的量成正比。其结果通过酶标仪在平行检测中与临界校正液和对照品相比较而得出。
二、弓形虫试剂盒的组成
1.抗原包被的微孔板:96孔,1块;
2.酶联试剂:12mL,1瓶,(红色液体)
3.样品稀释液:22mL,1瓶,(绿色液体)
4.阴性校正液:0IU/mL,l50μL,1瓶(无色盖)
5.临界校正液:32IU/mL,150μL,l瓶(黄色盖)
TOXO IgG Index=1
6.阳性校正液:100IU/mL,1瓶,(红色盖)
7.阳性校正液:300IU/mL,1瓶,(绿色盖)
8.阴性对照:范围见瓶签,150μL/瓶(蓝色盖)
9.阳性对照:范围见瓶签,150μL/瓶,(紫色盖)
10.洗涤浓缩液(20X):50mL, 1瓶
11.TMB试剂(一步):11mL ,1瓶
12.终止液(1N HCL):11mL,1瓶
三.弓形虫试剂盒的保存和仪器
1.试剂盒在2~8℃下保存。
2.微孔板保存在有干燥剂的密封袋中。
3.试剂盒在有效期内是稳定的。
4.试剂盒中的试剂在保存或使用期间,应避免暴露在热、阳光和强烈光线之中。
*警示与注意:
1.试剂盒的某些材料中可能含有潜在生物危险的组分,应按微生物学和生物医学实验室有关生物安全的规定进行操作和处理。
2.试剂盒仅适用于实验室。
3.勿用嘴吸移液管;禁止在样品和试剂盒试剂操作区吸烟、吃东西。
4.本试剂盒中的各组分是一个完整的单位,不同批号的组分 不能混用。
5.本试剂盒试剂中含有防腐剂*。*会与铅、铜形成爆炸性的金属化合物。
处理:用大量水冲洗。
四、弓形虫试剂盒样品的采集和制备:
1.采集血样并分离血清。
2.采集的样品在2~8℃下可保存7天。冰冻状态下可保存6个月。血清样品要避免反复冻融。