一、HSVII ELISA试剂盒用途及检测方法简述

·单纯性疱疹病毒(HSV)是一种普通的病原体，初期感染通常无症状。HSV有I型和Ⅱ型两种*的血清免疫学类型。

·HSV I型感染者一般伴有口腔感染并损害腰部以上部位；HSVⅡ型与先天性感染有关并损害腰部以下部位。其初期临床症状为：1．湿疹疱疹，伴有许多损害的湿疹性的皮肤改变；2．疱疹性龈炎；3．疱疹浓毒症，仅见于新生的早产儿。

本试剂盒是一种检测血清样品HSVⅡ型特异抗体IgG的精确的血清学方法。

·把纯化了的单纯性疱疹病毒Ⅱ型抗原包被在微孔表面加入经稀释的患者血清样品。若其中存在IgG，它与包被的抗原结合成为抗原—抗体复合物，用水洗去未结合物后加入底物和显色剂，所产生颜色的强度与样品中的抗体的量成正比。其结果通过酶标仪在平行检测中与临界校正液和对照品相比较而得出。

二、HSVII ELISA试剂盒试剂盒的组成

1．抗原包被的微孔板：96孔，1块

2．酶联试剂：12mL，1瓶，(红色液体)

3．样品稀释液：22mL，1瓶，(绿色液体)

4．阴性对照：150μL，1瓶，(无色盖)

5．临界校正液：150μL，1瓶，(黄色盖)

    HSVⅡIgG指数=1

6．阳性对照：150μL，l瓶，(红色盖)

7．洗涤浓缩液(20X)：50mL， 1瓶

8．TMB试剂(一步)：11mL，1瓶

9．终止液 (1N HCL) ：11ml,，1瓶

试剂盒的保存和稳定性

1．试剂盒在2~8℃下保存。

2．微孔板保存在有干燥剂的密封袋中。

3．试剂盒在有效期内是稳定的。

4．试剂盒中的试剂在保存或使用期间，应避免暴露在热、阳光和强烈光线之中。

*警示与注意：

1．试剂盒的某些材料中可能含有潜在生物危险的组分，应按微生物学和生物医学实验室有关生物安全的规定进行操作和处理。

2．本试剂盒仅适用于实验室。

3．勿用嘴吸移液管；禁止在样品和试剂盒试剂操作区吸烟、吃东西。

4．本试剂盒中的各组分是一个完整的单位，不同批号的试剂盒的组分不能混用。

5．本试剂盒试剂中含有防腐剂*。*会与铅、铜形成爆炸性的金属化合物。

处理：用大量水冲洗。

三、HSVII ELISA试剂盒样品的采集和制备

1．采集血样并分离血清；

2．采集的样品在2~8℃下可保存7天。冰冻状态下可保存6个月。血清样品要避免反复冻融。

四、HSVII ELISA试剂盒的准备

1．稀释的洗涤缓冲液的配制。按1：19的比例稀释洗涤浓缩液(20X)，即50mL洗涤浓缩液(20X)用蒸馏水或去离子水稀释至1升，已稀释的洗涤缓冲液在2~8℃下可稳定一个月，用前混合好。

2．使用前使全部样品和试剂达到室温(18~25℃下同)，并轻轻摇动。

五、HSVII ELISA试剂盒检测步骤

1．从酶标板上拆下所需数量的板条，并固定在支架上。

2．按1：40稀释待测样品、阴性对照、阳性对照和临界校正液。方法是将5μL上述样品分别加入到200μL样品稀释液中，充分混匀。

3．取100μL稀释的血清样品、临界校正液或对照品加入到相应的微孔中。并取100μL样品稀释液加入到1A位置的微孔内，作为空白对照。轻拍微孔架，去除液体中的气泡并充分混匀。37℃下温育30分钟。

4．把全部微孔中的液体清除干净后，用稀释的洗涤缓冲液冲洗5次。

5．向每个微孔中加入100μL酶联试剂，轻轻混合10