细胞产生的力高通量测试装置

背景:

细胞具有产生力的能力,细胞使用物理力量来执行重要的功能一一当这种力量被破坏时 ,在执行重要功能时缩短和再延长,疾病就会随之而来。传统上,

测量这样的力是困难的，但是以下两种新的方法现在可以同时测量成千上万个细胞的细胞产生的力。

测试方案:

一、细胞收缩力高通量检测多孔板-24、96、384孔板 :

图1:原理图:

1.1 )细胞收缩力测试24孔板

1.2 )细胞收缩力测试96孔板

1.3 )细胞收缩力测试384孔板

该可高通量检测细胞收缩力的多孔板是软膜底嵌有荧光微图案的特微孔板,上面有100,000多个均匀分布的X或+形的具有粘性蛋白质微图案,细胞沉降井

附着在其上,嵌入板中的X具有弹性,因此每当细胞收缩时它们就会收缩。X带有分子标记 ,可以发出荧光,从而可以成像和量化缩小的形状。

可以成像和定量,因此研究人员可以将X或十字架的变形与单个细胞或成千上万个细胞的一定量的力相关联。该技术还为研究人员提供了查看单个细胞钙

反应以及它们与细胞强度之间的关系的能力。

该技术也可以用于药物发现。研究人员可以快速,轻松地测试不同的治疗分子,以了解它们如何影响细胞力以及是否可以纠正任何潜在的力问题。

在具有可控刚度的弹性薄膜中嵌入用户设计的粘合剂和荧光微图案,形成密集但均匀的阵列(> 120微米/每平方毫米)。100000个 患者来源的单细胞(地从疾

病起源的人体组织中获得)立地定位并粘附在微图案上(每个微图案-一个细胞) ,它们对该微图案施加牵引力并明显改变其形状,从而能够在高的吞吐量下对

细胞收缩性进行直观的基于图像的评估。

1 )荧光弹性可收缩表面的微图案化

-在具有可控刚度 的弹性薄膜中嵌入用户设计的粘合剂和荧光微图案,形成密集但均匀的阵列(> 120微米/每平方毫米)。100000个患 者来源的单细胞(地从

疾病起源的人体组织中获得)立地定位并粘附在微图案上(每个微图案一个细胞) ,它们对该微图案施加牵弓|力并明显改变其形状,从而能够在高的吞吐量下

对细胞收缩性进行直观的基于图像的评估。

2)基于图像的受控单细胞收缩性的动力学可视化

例如, 384孔板内的每个附着细胞的微图案在延长的时间内以精细的时间分辨率被立监控,以直接观察收缩行为的部范围,从紧张性收缩到诱导性收缩

或松弛,以及任-效应的作用窗口。选择x形微图案以小化细胞基底接触面积,同时大化细胞扩散面积,从而在不同位置产生放大和集中的力。由于每个

微图案都与其他微图案机械分离,粘附的细胞不会将应变传递给相邻的微图案,从而确保对群体中每个单个细胞的收缩力进行可靠的评估。

3)单细胞收缩性的自动化和直观的图像分析

一基于该方法的检测产生直观、 明确的收缩信号一-提供直 接的图像分析,以从成像群体中的每个单细胞获得定量和可靠的数据。

可以同时获取1000多个均匀图案的单细胞的强大的收缩性数据,并与96和384孔板格式无缝地集成,以促进大规模的药物筛选。

二、细胞牵引力显微镜及微柱阵列介绍