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U2OS细胞(提供STR鉴定报告)
¥1580Hce-8693细胞(提供STR鉴定报告)
¥1680NCI-H1975细胞(提供STR鉴定报告)
¥1680SGC7901细胞(提供STR鉴定报告)
¥1680801-D细胞(提供STR鉴定报告)
¥1690SK-NEP-1细胞(提供STR鉴定报告)
¥1700HO-8910细胞(提供STR鉴定报告)
¥1700Eca-109细胞(提供STR鉴定报告)
¥1680HCT-8细胞(提供STR鉴定报告)
¥1700C-33A细胞(提供STR鉴定报告)
¥1750Hep G2细胞(提供STR鉴定报告)
¥1800ZR-75-1细胞(提供STR鉴定报告)
¥1680JM110 Chemically Competent Cell
产品规格
JM110: 100μl/支
pUC19 (control vector,10pg/μl): 10μl
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
基因型
rpsL (StrR) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacIqlacZΔM15]
JM110 Chemically Competent Cell 产品说明
JM110菌株具有硫酸链霉素抗性(StrR);是甲基化基因dam、dcm缺失的菌株,提取得到的质粒DNA,可被对dam、dcm甲基化敏感的内切酶切割;lacIqlacZΔM15的存在使JM110可以进行蓝白斑筛选,但转化效率不高,一般不用于质粒构建,只适用于质粒转化。JM110感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19 质粒检测转化效率约107 cfu/μg DNA。
操作方法
1. JM110感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项
1. 感受态细胞好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。