1. 体重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠，用5% 异氟醚深度麻醉小鼠，然后2.5% 异氟醚维持麻醉。

2. 在颈部中线切开一个切口。

3. 分离右侧的颈总动脉和迷走神经。

4. 右侧的颈总动脉暂时结扎。

5. 分离右侧的颈外动脉和颈内动脉，右侧的颈内动脉暂时结扎；右侧的颈外动脉头端结扎，近心端挂线备用。

6. 随后，用无菌的1ml注射器针头在右侧颈外动脉上做一个小洞，然后插入线栓，近心端挂线适度的系牢插入右侧颈外动脉的线栓，以防止血从小洞中流出；松开右侧颈内动脉暂时的结扎线，轻轻送入线栓到大脑中动脉，当感觉到阻力时停止，系牢线栓。

7. 缝合皮肤。

线栓法阻断大脑中动脉的方案

8. 60min后，线栓轻轻从大脑中动脉移出，系牢颈外动脉结扎线；然后松开右侧颈总动脉暂时的结扎线，小鼠进行再灌注。

9. 48h后神经功能评分，Garcia评分。

1）.自发性活动；

2）.四肢运动的对称性；

3）.前爪伸展；

4）.爬行；

5）.身体本体感觉；

6）.触须反应。

MCAO术前的小鼠评分在17.9±0.25分左右，缺血再灌注损伤48h后，评分在13.5±2.3分。