水溶性SEC柱

Zenix水溶性SEC柱

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2016-09-19 19:59:32
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广州尖分科学仪器有限公司

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产品简介

水溶性SEC柱采用单分散、球形、表面键合了一层纳米厚度中性亲水性薄膜的3 µm硅胶作为填料。3μm的粒径结合大的孔体积使其成为目前上分辨率Z高的体积排阻柱。

详细介绍

Zenix体积排阻色谱柱采用单分散、球形、表面键合了一层纳米厚度中性亲水性薄膜的3 µm硅胶作为填料。3μm的粒径结合大的孔体积使其成为目前上分辨率zui高的体积排阻柱。赛分科技*的表面键合技术保证了填料表面键合的zui大化,使其 具有高的化学稳定性及zui小的非特异性吸附。Zenix系列体积排阻柱有100、150及300Å三种孔径选择,广泛的应用于生物分子及水溶性聚合物的分离 与分析。

 

● 3 μm粒径
● 100、150、300 Å的孔径选择
● *的分离效率和分辨率
● 高容量
● 在低和高盐浓度下有高稳定性
● 批间重复性
● 高的蛋白回收率而不破坏生物活性
● 可忽略的非特异性反应
● 蛋白、核酸、寡核苷酸、多肽和病毒类生物分子能实现理想的分析和分离
● 自然多聚体(如:多糖)、合成多聚体和纳米材料(如:纳米颗粒)能够实现理想的分析和分离

 

zui高的分辨率

 

    开发小粒径填料的优势在于能实现更高的分离效率和分辨 率。当粒径从5 μm降至3 μm时,柱效几乎为原先的两倍。如图1和表1所示:当填料粒径从5 μm降至3 μm时,BSA二聚体、BSA、核糖核酸酶A的塔板数分别从2720、6590、11160提高到4600、13090、22000。图2和表2进一步表 明3 μm Zenix柱在分离各种蛋白时能实现更高的分离效率。P-氨基苯甲酸使用30 cm长的Zenix柱时能够达到40,000的塔板数。

 

图1. Zenix SEC-300和SRT SEC-300分离蛋白混合物A 

17.jpg

色谱柱:    Zenix SEC-300和SRT SEC-300
流动相:    150mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速:        7.8x300 mm为1.0 mL/min; 4.6x300 mm为0.35 mL/min
温度:        室温(~23℃);        
检测器:    UV 214 nm
进样量:    10 μL (4.6x300 mm为3 μL)
样品:      1) 甲状腺球蛋白(1.0 mg/mL), 670 kD; 2) BSA二聚体, 132 kD;          3)  BSA (1.0 mg/mL), 66 kD; 4) 核糖核酸酶A (1.0 mg/mL), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶(2.5 μg/mL), 120 D

 

 

 
表1. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率

蛋白

Zenix 300   

Zenix 300

SRT 300

(4.6x300) 

(7.8x300)

(7.8x300)

1

甲状腺球蛋白

2180

1730

1120

2

BSA二聚体

4390

4600

2720

3

BSA

10280

13090

6590

4

核糖核酸酶A

16490

22000

11160

5

尿嘧啶

33640

38500

27860

                                                   

 

 

图2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率 (内径为7.8 mm)

 

18.jpg色谱柱:   Zenix SEC (7.8x300 mm, 3 µm)
流动相:   150 mM PBS, pH 7.0
流速:      1.0 mL/min
反压:      Zenix SEC-300为1,375 psi, Zenix SEC-150为1,100psi
温度:     室温(~ 23℃)
检测波长:  214 nm
进样量:   10 μL
样品:    1)甲状腺球蛋白 (1.0 mg/L), 670 kD; 2)BSA二聚体, 132 kD; 3) BSA (1.0 mg/L), 66 kD; 4)核糖核A (1.0 mg/L), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶 (2.5 μg/mL), 120 D.

 

 

    

表2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率

 

 

蛋白

Zenix 150

Zenix 300

1

甲状腺球蛋白

18050

2460

2

BSA二聚体

2420

5110

3

BSA

5620

13090

4

核糖核酸酶A

17600

22000

5

尿嘧啶

42000

38500

                                                        

 

 

高载样量

 

    载样量是衡量体积排阻色谱柱性能的重要指标之一,下图表明Zenix系列分析色谱柱在BSA上样量高达500 µg的情况下,仍保持着*的分析峰形。

 

图3. Zenix SEC-150 色谱柱对BSA载样量的测试图谱

 

19.jpg

色谱柱:      Zenix SEC-150 (3 µm, 7.8x300 mm)
流动相:      150 mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速:          1.0 mL/min
进样量:      10 µL
检测器:      UV 214 nm

 

 

 

图4. Zenix SEC-300 色谱柱对BSA载样量的测试图谱


色谱柱:     Zenix SEC-300 (3 µm, 7.8x300 mm)
流动相:     150 mM Sodium phosphate buffer, pH 7.0
流速:         1.0 mL/min
进样量:     10 µL
检测器:     UV 214 nm

 

 

 
高稳定性

 

    赛分科技*的表面修饰技术使得硅胶表面的键合密度达到 zui大化,从而阻止了能够促进键合相脱落的溶剂分子向薄膜内侧的扩散,保证了其在pH 2-8.5范围的稳定使用。Zenix体积排阻柱适用于大多数水性及有机溶剂,包括:醋酸、磷酸、Tris缓冲盐体系、甲醇、乙醇、THF、DMF、 DMSO等,同时可耐受高盐溶液,如2.0 M的NaCl。


流动相的兼容性

 

    Zenix SEC固定相能与大多水相缓冲液兼容,如醋酸铵、磷酸盐、Tris等。Zenix SEC固定相能够承受高浓度盐,如2.0 M。同时Zenix SEC柱在有机溶剂中,如甲醇、乙醇、四氢呋喃、2,5-二甲基呋喃、二甲基亚砜等,水和有机溶剂混合相中均能保持稳定。


高蛋白回收率

 

    Zenix SEC固定相为亲水性和中性,蛋白和其他生物分子与固定相之间的非特异性吸附可忽略。可抑制蛋白吸附到硅胶固定相表面的作用,从而能够实现蛋白高的回收率,在分离后能够保持蛋白的活性。酸性和碱性蛋白的代表BSA和溶菌酶的回收率能够高于95%。

 

Zenix SEC色谱柱技术参数表

固定相

Zenix SEC-80

Zenix SEC-100

Zenix SEC-150

Zenix SEC-300

材料

表面键合亲水薄膜的硅胶

表面键合亲水薄膜的硅胶

表面键合亲水薄膜的硅胶

表面键合亲水薄膜的硅胶

颗粒大小

3 µm

3 µm

3 µm

3 µm

孔径 (Å)

~ 80

~ 100

~ 150

~ 300

蛋白分子量范围

100 – 50,000

100 - 100,000

500 - 150,000

5,000 – 1,250,000

水溶性聚合物分子量范围

500 – 5,000

500-10,000

500-25,000

1,000-100,000

pH 稳定性

2 –8.5,短时间可耐pH 8.5-9.5

2 – 8.5,短时可耐pH 8.5-9.5

2 – 8.5,短时可耐pH 8.5-9.5

2 – 8.5,短时可耐pH 8.5-9.5

反压 (for a 7.8x300 mm)

~ 1,500 psi 

~ 1,500 psi 

~ 1,500 psi 

~ 1,500 psi

zui大耐受压力 (psi)

~ 4,500

~ 4,500

~ 4,500

~ 3,500

盐浓度范围

20 mM - 2.0 M

20 mM - 2.0 M

20 mM - 2.0 M

20 mM - 2.0 M

zui高使用温度 (oC)

~ 80

~ 80

~ 80

~ 80

流动相的兼容性

常规水相及有机相溶剂

常规水相及有机相溶剂

常规水相及有机相溶剂

常规水相及有机相溶剂

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