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Zenix体积排阻色谱柱采用单分散、球形、表面键合了一层纳米厚度中性亲水性薄膜的3 µm硅胶作为填料。3μm的粒径结合大的孔体积使其成为目前上分辨率zui高的体积排阻柱。赛分科技*的表面键合技术保证了填料表面键合的zui大化,使其 具有高的化学稳定性及zui小的非特异性吸附。Zenix系列体积排阻柱有100、150及300Å三种孔径选择,广泛的应用于生物分子及水溶性聚合物的分离 与分析。
● 3 μm粒径
● 100、150、300 Å的孔径选择
● *的分离效率和分辨率
● 高容量
● 在低和高盐浓度下有高稳定性
● 批间重复性
● 高的蛋白回收率而不破坏生物活性
● 可忽略的非特异性反应
● 蛋白、核酸、寡核苷酸、多肽和病毒类生物分子能实现理想的分析和分离
● 自然多聚体(如:多糖)、合成多聚体和纳米材料(如:纳米颗粒)能够实现理想的分析和分离
zui高的分辨率
开发小粒径填料的优势在于能实现更高的分离效率和分辨 率。当粒径从5 μm降至3 μm时,柱效几乎为原先的两倍。如图1和表1所示:当填料粒径从5 μm降至3 μm时,BSA二聚体、BSA、核糖核酸酶A的塔板数分别从2720、6590、11160提高到4600、13090、22000。图2和表2进一步表 明3 μm Zenix柱在分离各种蛋白时能实现更高的分离效率。P-氨基苯甲酸使用30 cm长的Zenix柱时能够达到40,000的塔板数。
图1. Zenix SEC-300和SRT SEC-300分离蛋白混合物A
色谱柱: Zenix SEC-300和SRT SEC-300
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表1. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率
峰 | 蛋白 | Zenix 300 | Zenix 300 | SRT 300 |
(4.6x300) | (7.8x300) | (7.8x300) | ||
1 | 甲状腺球蛋白 | 2180 | 1730 | 1120 |
2 | BSA二聚体 | 4390 | 4600 | 2720 |
3 | BSA | 10280 | 13090 | 6590 |
4 | 核糖核酸酶A | 16490 | 22000 | 11160 |
5 | 尿嘧啶 | 33640 | 38500 | 27860 |
图2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率 (内径为7.8 mm)
![]() | 色谱柱: Zenix SEC (7.8x300 mm, 3 µm) 流动相: 150 mM PBS, pH 7.0 流速: 1.0 mL/min 反压: Zenix SEC-300为1,375 psi, Zenix SEC-150为1,100psi 温度: 室温(~ 23℃) 检测波长: 214 nm 进样量: 10 μL 样品: 1)甲状腺球蛋白 (1.0 mg/L), 670 kD; 2)BSA二聚体, 132 kD; 3) BSA (1.0 mg/L), 66 kD; 4)核糖核A (1.0 mg/L), 13.7 kD; 5) 尿嘧啶 (2.5 μg/mL), 120 D.
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表2. Zenix SEC-150和Zenix SEC-300分离效率
峰 | 蛋白 | Zenix 150 | Zenix 300 |
1 | 甲状腺球蛋白 | 18050 | 2460 |
2 | BSA二聚体 | 2420 | 5110 |
3 | BSA | 5620 | 13090 |
4 | 核糖核酸酶A | 17600 | 22000 |
5 | 尿嘧啶 | 42000 | 38500 |
高载样量
载样量是衡量体积排阻色谱柱性能的重要指标之一,下图表明Zenix系列分析色谱柱在BSA上样量高达500 µg的情况下,仍保持着*的分析峰形。
图3. Zenix SEC-150 色谱柱对BSA载样量的测试图谱
色谱柱: Zenix SEC-150 (3 µm, 7.8x300 mm)
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图4. Zenix SEC-300 色谱柱对BSA载样量的测试图谱
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高稳定性
赛分科技*的表面修饰技术使得硅胶表面的键合密度达到 zui大化,从而阻止了能够促进键合相脱落的溶剂分子向薄膜内侧的扩散,保证了其在pH 2-8.5范围的稳定使用。Zenix体积排阻柱适用于大多数水性及有机溶剂,包括:醋酸、磷酸、Tris缓冲盐体系、甲醇、乙醇、THF、DMF、 DMSO等,同时可耐受高盐溶液,如2.0 M的NaCl。
流动相的兼容性
Zenix SEC固定相能与大多水相缓冲液兼容,如醋酸铵、磷酸盐、Tris等。Zenix SEC固定相能够承受高浓度盐,如2.0 M。同时Zenix SEC柱在有机溶剂中,如甲醇、乙醇、四氢呋喃、2,5-二甲基呋喃、二甲基亚砜等,水和有机溶剂混合相中均能保持稳定。
高蛋白回收率
Zenix SEC固定相为亲水性和中性,蛋白和其他生物分子与固定相之间的非特异性吸附可忽略。可抑制蛋白吸附到硅胶固定相表面的作用,从而能够实现蛋白高的回收率,在分离后能够保持蛋白的活性。酸性和碱性蛋白的代表BSA和溶菌酶的回收率能够高于95%。
Zenix SEC色谱柱技术参数表
固定相 | Zenix SEC-80 | Zenix SEC-100 | Zenix SEC-150 | Zenix SEC-300 |
材料 | 表面键合亲水薄膜的硅胶 | 表面键合亲水薄膜的硅胶 | 表面键合亲水薄膜的硅胶 | 表面键合亲水薄膜的硅胶 |
颗粒大小 | 3 µm | 3 µm | 3 µm | 3 µm |
孔径 (Å) | ~ 80 | ~ 100 | ~ 150 | ~ 300 |
蛋白分子量范围 | 100 – 50,000 | 100 - 100,000 | 500 - 150,000 | 5,000 – 1,250,000 |
水溶性聚合物分子量范围 | 500 – 5,000 | 500-10,000 | 500-25,000 | 1,000-100,000 |
pH 稳定性 | 2 –8.5,短时间可耐pH 8.5-9.5 | 2 – 8.5,短时可耐pH 8.5-9.5 | 2 – 8.5,短时可耐pH 8.5-9.5 | 2 – 8.5,短时可耐pH 8.5-9.5 |
反压 (for a 7.8x300 mm) | ~ 1,500 psi | ~ 1,500 psi | ~ 1,500 psi | ~ 1,500 psi |
zui大耐受压力 (psi) | ~ 4,500 | ~ 4,500 | ~ 4,500 | ~ 3,500 |
盐浓度范围 | 20 mM - 2.0 M | 20 mM - 2.0 M | 20 mM - 2.0 M | 20 mM - 2.0 M |
zui高使用温度 (oC) | ~ 80 | ~ 80 | ~ 80 | ~ 80 |
流动相的兼容性 | 常规水相及有机相溶剂 | 常规水相及有机相溶剂 | 常规水相及有机相溶剂 | 常规水相及有机相溶剂 |