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农残残留速测试剂AN203
1、试剂配制及保存
缓冲液:取1包缓冲剂加1000mL蒸馏水或纯净水,搅拌溶解制成磷酸缓冲液,室温保存。
显色剂:取1瓶显色剂加25mL缓冲液溶解,使用时取50μL,4℃冰箱保存。
底 物:取1瓶底物加10mL蒸馏水或纯净水溶解,使用时取50μL,4℃冰箱保存。
胆碱酯酶:酶制剂(丁酰胆碱酯酶)无需配制,直接取用50μL,4℃冰箱保存。
2、农残残留速测试剂AN203 样品提取
取2g果蔬样品(块茎类取4g)剪成1cm左右见方碎片,放入小烧杯(或取样瓶)中;加入20mL缓冲液,振荡1~2min,倒出提取液,静置2min待测。
3、测试
对照测试:于反应瓶中加入3mL缓冲液,再分别加入50μL显色剂和酶液,混匀,37℃下放置30 min后加入50μL底物,摇匀并立即倒入比色杯中,放入测试通道,按仪器“对照”键测试3min的吸光度变化值ΔΑ0 .
样品测试:于反应瓶中加入3mL待测样品液,再分别加入50μL显色剂和酶液,混匀,37℃下放置30 min后加入50μL底物,摇匀并立即倒入比色杯中,放入测试通道,按仪器“样品”键,测试3min的吸光度变化值ΔΑt .
结果判定:
◇ 以分光光度计测试时,按以下表达式计算出抑制率:
抑制率(%)=[(ΔΑ0-ΔΑt )/ΔΑ0]×100
◇ 以农残检测仪检测时其抑制率一般可自动计算。若样品抑制率≥70%,表示被测果蔬农残超标,为阳性结果。阳性结果的样品需做2次以上重复检测,多次检测仍呈阳性需用气相色谱等仪器做进一步确认。
操作提示:在加底物的环节中,可预先将底物加入比色杯,待静置时间一到,马上将反应瓶中的反应液倒入已经加有底物的比色杯,并迅速放入测试通道进行测试。这样可以减少同时检测多个样品时因加底物时间过长而造成的误差。
4、注意事项
酶活性要求:本试剂盒中酶试剂正常活性ΔA0=0.4~0.8,符合NY/T 448-2001方法的要求。
保存:试剂盒应保存于4℃冰箱,保质期12个月。
使用:任何试剂使用时,用一瓶打开一瓶,用完后才使用新的,防止变质。
器具原则:任何用于移液的器具和容器都应各自贴上标签,单独使用,以免交叉污染。
试剂只出不入原则:测试时,从任何试剂瓶吸出的试剂,禁止再次注射回试剂瓶。
环境温度对测试的影响:当环境温度过低时(一般低于20℃),测试时需作必要保温措施。