大豆异黄酮是大豆生长中形成的一类次级代谢产物。由于是从植物中提取，与雌激素有相似结构，因此称为植物雌激素。大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性，是天然的癌症化学预防剂。异黄酮是一种弱的植物雌激素，大豆是人类获得异黄酮的惟一有效来源。

本文选取我国居民日常食用的主要豆制品，对其中雌激素样活性较强的染料木素和大豆苷元以 及它们对应的糖苷进行定量检测，从大豆异黄酮的组成和含量两方面进行分析评估，进而了解我国豆制品中大豆异黄酮含量的基本情况，为以后全面深入的研究奠定 基础。由于食品中大豆异黄酮的检测尚无国家标准，因此选用较通用的液相色谱法为本研究的检测方法。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

标准品；大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素；正己烷、甲醇(分析纯)；甲醇(色谱纯)。

1.2 仪器与设备

Waters 1525液相色谱仪，系统包括515HPLC双泵、Waters 2996光电二级管列检测器；DZG-6050真空干燥箱；KQ-2200超声波清洗器。

1.3 方法

1.3.1样品制备

固体样品10～45 g，粉碎，55℃真空干燥24h，进一步粉碎，每份称取0.2 g；加5mL正己烷，超声脱脂10 min，离心(3 000 r/min，3 min)。弃去正己烷；加10mL 80％甲醇，超声萃取10min，离心(3 000 r/min，3 min)，转移上清液，通风橱中70℃水浴挥发至干，80％甲醇复溶至0.4mL，过膜，待测。

液体样品10 mL；加2.5 mL正己烷，超声萃取10 min，静置，弃去上层脂肪层。取2 mL溶液。加8 mL甲醇，超声萃取10 min，离心(3 000 r/rain，3 min)，转移上清液，通风橱中70℃水浴挥发至干，80％甲醇复溶至0.4 mL，过膜，待测。

1.3.2         HPLC条件

色谱柱为kromasil C18柱(4.6minx250mm，5um)；流动相为甲醇(A)/水(B)，梯度洗脱条件：0-15 min，30％～70％B，15～30 min。70％-30％B；流速0.6 mL/min；柱温25℃；进样量20uL；检测波长254 nm。

1.3.3标准曲线的绘制

称取4种对照品各5 mg左右，然后分别置于10 mL容量瓶中，80％甲醇溶解，定容、摇匀，配成约0.5 mg/mL贮备液。再由贮备液分别配成约2、4、8、16、32、64、128 mg/L的7个浓度梯度工作液，HPLC检测。

2 结果与分析

2.1 方法学考察

由分离结果图1可看出，在此色谱条件下4种化合物分离良好，保留时间合适。

2.1.1线性关系及检出限

由表l回归系数可看出，在2～128 mg/mL浓度范围内。各峰线性关系良好，可用于定量分析。进样量为20uL时，大豆苷(D)、染料木苷(G)、大豆苷元(Da)、染料木素(Ge)的zui 低检出浓度(以S/N≥3计)分别为：0.200、0.015、0.400、0.0060ug/mL。

2.1.2重现性

每类样品选1个样，每个样称取同等质量5份。按上述方法制备后对每份样做含量检测，检测结果发现每类样品中。4种化合物含量的RSD值均≤2.58％，说明此方法重现性好，准确度高。

2.1.3精密度

每类样品选1个样，连续进样6次，检测结果发现每类样品中，4种化合物含量的RSD值均≤2.78％，说明此方法重现性好，精密度高。

2.1.4回收率

每类样品选1个样，在测得已知含量的样品溶液中，按方法学原则，在0.5～2倍之间取3个浓度0.5、l、2，加标，测3次，计算回收率。每类样品在不同 加标倍数下，4种化合物的回收率范围分别为D:88.30%-105.53%。G:84.92%-l 13.7%，Da:93.07%-115.76%，Ge:91.18%-107.92%。RSD范围：1.22%-3.56%。说明此方法加标回收率较 好，准确度较高。