产品名称：Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit         

产品货号：Y30021

产品说明：

我们的CRISPR / Cas9系统是介导哺乳动物细胞中基因组编辑的一种简单的，RNA可编程的方法；它可用于在hiPS细胞中产生基因敲除（通过插入/删除）或敲除（通过HDR）。交付Cas9-sgRNA核糖核蛋白（RNP）复合物后，必须分离单个细胞并将其扩增为克隆细胞系，以分离和筛选目标基因型。传统上，从作为集落生长和传代的经过编辑的hiPS细胞建立克隆种群效率低下且耗时。通常，它会导致细胞死亡或过早分化。为克服这一挑战，我们开发了完整的系统，该系统通过有效传递Cas9-sgRNA RNP复合物和hiPS细胞的单细胞克隆，将无足迹的基因编辑结合在一起。使用我们基于单层的培养系统可成功完成单细胞克隆

产品介绍：

人诱导多能干细胞（Human induced pluripotent stem cells，hiPSCs)是一个功能强大的研究工具和疾病模型，因为其具备增殖、自我更新、分化为多种细胞类型的能力。此外，人iPS细胞还可以再现细胞来源个体的疾病表型和基因型。将人iPS细胞结合基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术，可以在同基因的细胞系中研究特定基因改变引起的功能影响，因为基因编辑过的人iPS细胞能提供可再生的、无遗传变异的患病细胞和健康细胞资源。

CRISPR/Cas9系统已经成为一个强大的基因编辑工具，因为其高的靶向特异性，编辑效率和易用性。该技术的强大主要源于它的简单，因为全部只需要一个Cas9核酸酶结合一个单链向导RNA（single guide RNA，sgRNA) 就可以决定靶向特异性（Jinek et al. 2012)。这种RNA编程的（RNA-programmable）方法利用了非同源末端连接(non-homologous end joining，NHEJ) DNA修复途径的易错特性，进而产生基因敲除(通过插入/删除)。这种方法也可以通过同源重组（homology-directed repair，HDR)途径被用于基因敲入。

 CRISPR/Cas9系统的组件可以通过多种方法成功导入至靶细胞，包括基于载体的表达系统，RNA转染, 导入Cas9/sgRNA核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP)复合物(Sander and Joung 2014)等。与基于载体的方法相比，直接导入Cas9/sgRNA RNPs提供了一种快速转入基因编辑实验的方法，同时脱靶效应的可能性更小（Kim et al. 2014)。

 一旦Cas9/sgRNA RNP复合物被导入，为了分离和筛选感兴趣的基因型，单细胞必须被分离并扩增为克隆细胞系。传统上,从基因编辑的hiPS细胞建立一个克隆群是低效的、具有挑战性的和耗时的，因为hiPS 细胞是以集落生长和传代的。通常，这会导致细胞死亡和提前分化。然而，Cellartis基因编辑和单细胞克隆系统包含一个成分确定的培养系统(由基础培养基，包被剂，和添加剂组成)，用于有效形成单细胞克隆和扩增基因编辑后的hiPSC克隆。DEF-CS culture system (Asplund et al. 2016)是一个基于单层培养的系统，规避了集落状培养带来的挑战，允许单细胞传代和促进接种的单细胞存活和后续扩增。

 Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021) 是一个完整的，在无饲养层和成分确定条件下，用于hiPSCs有效扩增和扩大生产的系统。试剂盒包含了从接种单细胞至96孔板到扩增至48孔板过程中所有必要的试剂。单细胞克隆扩增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。

 Cellartis iPSC rCas9 Electroporation and Single-Cell Cloning System (Code No. 632643) 是一个完整的系统，允许通过电穿孔的方法对hiPSCs进行有效的基因编辑以及随后的单细胞克隆形成和扩增至48孔板。该系统中提供了重组Cas9蛋白质，以及产生大量sgRNAs所有必要的试剂，用于电穿孔hiPSCs。系统中也包括Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (前面所述) 组份，用于进行基因编辑后的单细胞克隆形成和扩增。单细胞克隆扩增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。

 Cellartis iPSC CRISPR/Cas9 Gesicle and Single-Cell Cloning System (Code No. 632642)是一个完整的系统，允许通过gesicle导入Cas9/sgRNA复合物进行有效的基因编辑随后的单细胞克隆形成和扩增至48孔板。Gesicles是一种无毒的、高效的、替代电穿孔的方法，不依赖昂贵的设备或耗材。系统中提供所有的必要试剂用于产生细胞衍生的纳米囊泡（称做gesicles），来转导Cas9和sgRNA至hiPSCs。系统中也包括Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit（前面所述）组份，用于进行基因编辑后的单细胞克隆形成和扩增。单细胞克隆扩增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。

 ■ 产品特点

·在hiPSC中进行高效的基因编辑—使用电穿孔或囊泡来递送Cas9蛋白和sgRNA，而没有基因组整合并且降低脱靶效应

·优异的单细胞存活率—编辑的hiPSC植入96孔板中的单个细胞

·编辑后和单细胞克隆期间保持多能性-hiPSC维持多能性标记Oct-4，TRA-1-60和SSEA-4的高水平（> 90％）

·稳定的核型从头到尾—在编辑，单细胞克隆和扩增过程中保持正常且稳定的核型

·灵活地按自己的方式进行基因编辑实验-选择完整的试剂盒，该试剂盒可以使用基于电穿孔的（Code No. 632643）或基于囊泡的（Code No. 632642）CRISPR / Cas9技术提供编辑和单细胞克隆解决方案，或者在您自己的编辑实验后，利用培养基试剂盒（代码Y30021）执行有效的单细胞克隆

·在整个基因编辑/单细胞克隆实验中继续使用DEF-CS技术-使用Cellartis DEF-CS 500培养系统（代码编号Y30010）在基因编辑实验之前和之中，然后在单细胞克隆实验之后放大期间

产品名称：CellArits代理 iPSC单细胞克隆培养基试剂盒        产品货号：Y30021

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热卖产品：

品牌       货号       产品描述                                                               包装

CellArtis  Y30010     DEF-CS 500 Culture System,DEF-CS 500培养系统，人iPS和人ES增殖用培养基  1套

CellArtis  Y30021     Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit           1套

CellArtis  Y40030     GS2-M小鼠 iPS/ES干细胞无血清培养基                                     1套

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1993年，以中国的宝生物工程（大连）有限公司为中心，建立了研究用试剂的生产制造工厂，其中关于分子生物学及细胞生物学分支的研究用试剂的制造已经取得了ISO9001认证，产品具有很高的品质和成本竞争力。
    关于研发，Takara Bio构建了日美欧中一体的研究开发体系。利用各地特性建设开发小组，努力提升新产品、新服务的开发力度及开发速度，从而形成更好的产品更快地投入市场的体制。
关于销售，通过美国、欧洲、中国、韩国及印度的子公司和Takara Bio形成了*的销售网，努力提高「TaKaRa®」「Clontech®」「Cellartis®」产品的品牌度并扩大产品销售。
Takara Bio在引以为傲的基因工程学领域基础上，也着手于未来有望拓展市场的再生医疗、细胞医疗研究领域的产品开发。在基因工程学方面，着重于扩大PCR技术的应用领域（Applied Field），及已处于市场日益增长的新一代测序相关新产品的开发等。在再生医疗、细胞医疗研究领域，正不断地进行处于研发活跃期的iPS细胞（人工多能干细胞）及基因组编辑相关的新产品和新服务项目的开发。

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华雅再生医学旗舰公司-红荣微再（上海）生物工程技术有限公司：干细胞、细胞冻存、细胞治疗、试剂耗材 相关板块的产品，以“传递科学价值，服务科学研究”为宗旨，经过近五年的努力推广，重庆市华雅干细胞技术有限公司在全中国代理的BD科研产品、OriGen干细胞冻存袋等产品已经成功销往：上海市、北京市、重庆市、天津市、广东省的广州市、深圳市、珠海市、江西省的南昌市、四川省的成都市、绵阳、浙江省的杭州市、宁波、温州、江苏省的南京市、苏州、无锡、泰州、湖南省的长沙、陕西省的西安市、杨凌、甘肃省的兰州、宁夏的银川、新疆的乌鲁木齐、广西省的南宁市、山东省的济南、青岛、东北三省 辽宁省的沈阳市、大连市、吉林省的长春市、黑龙江省的哈尔滨市等中国绝大部分省市和自治区。

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