产品介绍：

　本试剂盒适用于从多种植物中提取RNA，即便是从多糖多酚含量丰富的植物中也能成功提取高质量的RNA，如水稻叶片、小麦叶片、玉米叶片、烟草叶、松针、银杏叶、杨树叶、石榴叶、冬青叶、苹果、桃、梨、西红柿、樱桃、杏、香蕉、葡萄、枇杷、桂圆果皮、桂圆果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、大豆等样本。*的裂解液配方，可使细胞中的RNA酶迅速灭活，有效去除多糖多酚对RNA提取的影响，无需氯仿等试剂，同时采用硅基质膜吸附RNA进行纯化，提取的总RNA纯度高，无基因组、蛋白质和其它杂质的污染,可用于Real Time RT-PCR、RT-PCR 、Northern Blot、Dot Blot、和体外翻译等多种下游实验。

产品名称：康为世纪 植物RNA提取试剂盒 （DNase I)

产品货号：CW2598S

产品组份：

操作步骤:

1．匀浆处理：取50-100mg植物组织在液氮中迅速研磨成粉末，加入500 μl Buffer RLS（使用前请先检查是否加入β-巯基乙醇），立即涡旋剧烈震荡混匀。

2．4°C 12,000 rpm（~13,400×g）离心2分钟。

3．将上清液转入已装入收集管的过滤柱（Spin Columns FS）中，4°C 12,000 rpm离心1分钟，小心吸取收集管中的上清并转移至新的RNase-Free 离心管（自备）中，枪头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。

4．缓慢加入0.5倍上清体积的无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀），将得到的溶液和沉淀一起转入已装入收集管的吸附柱（Spin Columns RM）中，若一次不能将全部溶液加入吸附柱中，请分两次转入。4°C 12,000 rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。

5．向吸附柱RM中加入350 μl Buffer RW1，4°C 12,000 rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。

6．配制DNase I 混合液：取52 μl RNase-Free Water，向其中加入8 μl 10×Reaction Buffer和20 μl DNase I（1 U/μl），混匀， 配制成终体积为80 μl的反应液。

7．向吸附柱中直接加入80 µl DNase I 混合液，20-30℃孵育15分钟。

8．向吸附柱RM中加入350 μl Buffer RW1，4°C 12,000 rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。

9．向吸附柱RM中加入500 μl Buffer RW2（使用前检查是否加入无水乙醇）, 4°C 12,000 rpm离心1 分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。

10．重复步骤9。

11．4°C 12,000 rpm离心2分钟。

12．将吸附柱RM装入新的RNase-Free Centrifuge Tubes（1.5 ml）中，向吸附膜的中间部位悬空滴加30-50 μl RNase-Free Water，室温放置2分钟，4°C 12,000 rpm离心1分钟，得到的RNA溶液保存在-70℃，防止降解。

相关知识：

从不同细胞中分离提取高纯度、高质量的RNA对于很多分子生物学实验至关重要，如cDNA的合成、Northern印记分析、mRNA差别显示技术分离基因以及转录组测序等等实验，很大程度上取决于RNA的完整性。然而由于RNA自身结构的特点，以及周围环境中众多而又稳定存在的RNA酶，常常会使得RNA发生降解。在植物果实组织中，如玉米籽粒、柑橘、香蕉，含有丰富的多糖、蛋白，由于多糖与RNA在溶解性上高度一致，导致二者形成非常难溶的胶状复合物，使得RNA提取量下降，并造成一定程度上的降解；在植物老化组织中，如玉米老叶、冬青叶、茶叶，含有大量的多酚，当其氧化后，会使得RNA沉淀变成褐色，干扰了后续实验；有些产生次生代谢组织，如葡萄、苹果、甘蔗，其次生产物会降低RNA的获取率。

产品订购信息：

品牌             货号                   名称                                      规格

康为世纪   CW2598S  OminiPlant RNA Kit （Dnase I）     50preps

产品名称：康为世纪 植物RNA提取试剂盒 （DNase I)

产品货号：CW2598S

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