1、实验室如何选择适合的血清?

在国内*的血清是GIBCO和HYCLONE，度和使用范围非常普遍，但是价格普遍偏贵。life-ilab这个品牌是李记生物的自主品牌，国外直接贴牌，在20多个品牌中选择质量、批间差异小的大量采购，很大程度降低批次间差异。研发小组及广大的科研客户使用反馈效果很好，价格实惠！对于特殊的细胞李记生物采购GIBCO或HYCLONE血源，同样经过检测，用实在的实验数据确定采购批次，而不是迷信品牌。

2、胎牛血清和小牛血清的区别及注意事项？

    来源不同：新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14天的小牛，而胎牛血清(FBS)是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。

组份与比例不同：两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同，

使用浓度不同：一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。

注意事项：某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可。

3、怎样储存和解冻血清避免产品质量受损?

    首先需要将血清产品从冷冻箱中取出，先放置于2～8℃冰箱使之溶解，然后放在室温中使之全融。在融解过程中需要不定时的轻微晃动，使血清成分均匀，减少融化过程中产生沉淀机会。

    其次，血清长时间存放于2-8℃时，可能会聚集各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)而形成沉淀或可见的混浊。因此，我们推荐长期储存血清需在-20℃以下，并避免反复冻融。

    后，若短期使用存放于4℃时，请勿超过一个月。若在实验中血清未能一次用完一瓶血清，建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内（由于血清结冻时体积会增加约10%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形），再放回冷冻。

4、血清中包含絮状沉淀是什么？怎么处理?

沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。融化过程产生沉淀是正常特性，不会影响产品性质。想要去除这些絮状沉淀物，有两种方法：1、可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀，因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。2、将血清小心的转移到另一个无菌瓶里，大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以，使用产品时要摇动并加热血清至37℃，沉淀会自然消失。

5、如何避免血清中产生沉淀?

按如下操作可避免沉淀的产生：

(1)在2～8℃解冻血清时，请将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。同样原理，分装冻存的时候，须轻微的均匀摇晃，避免产生气泡，使温度与成分均一！

(2)勿直接由-20℃直接放置于37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。

(3)勿将血清置于37℃太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏，从而影响血清的品质。

(4)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

(5)若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

6、培养基中添加了血清和抗生素后，可长期保存吗?

    一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，应该在两到三周内使用完它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

7、为什么要热灭活血清?

     事实上，大部分细胞培养不需要灭火血清，仅在培养部分特殊细胞时进行灭火。如在免疫学研究，培养ES细胞、平滑肌细胞等特殊细胞时，推荐使用热灭活血清。因为加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。

8、有必要做热灭活吗?

在大多数情况下不需要热灭活处理，不但节省时间，更确保血清的质量!因为经过热处理的血清，沉淀物的行程会显著的增多，这些沉淀物在倒置显微镜下观察会发现有很多的“小黑点”，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。

9、血清需要做支原体检测吗

支原体污染是世界性问题，有报道指出，支原体轻微污染即可影响200多个基因的表达，Nature杂志从2013年起，要求涉及细胞培养的研究，必须进行支原体检测。李记生物每批次血清均用支原体检测试剂进行检测，可以检出99.9%的已发现支原体种类，客户不需要另外检测，但我们仍然强烈建议培养细胞中定期进行支原体检测，以排除实验操作中人为带入支原体污染。