李记生物细胞转染试剂常见问题（一）

时间：2022-11-07 阅读：1902

涉及产品

Q1：李记有3款转染试剂，这3款有什么区别？和Li**对比效果如何？

A1：我司自行测试与收集客户反馈数据，得到类似结论：

　　效率方面：EZ Trans Plus＞Li**2000≈EZ Trans(高效)＞Li** 3000＞EZ Trans(低毒)

　　毒性方面：EZ Trans(低毒)≈Li**3000＜EZ Trans Plus＜EZ Trans(高效)≈Li**2000

Q2：我们传的细胞有抗生素，抗生素是绝对会影响转染效率吗？

A2：能不加尽量不加，理论上抗生素进不到细胞内，但是在转染试剂的作用下，细胞的通透性增加，抗生素可能进到细胞内，对实验结果完成影响。

Q3：protocol提到，要用Opti-MEM稀释质粒和转染试剂。不能用1640稀释么？另外质粒和转染试剂为什么要先稀释然后再混合？不能把转染试剂直接加到质粒溶液中混合，然后再加培养基稀释么？

A3：EZ Trans细胞转染液属于阳离子类型的转染试剂，它与DNA形成复合物需要一定的条件，在合适的浓度下，有利于阳离子包裹DNA形成良好形态的复合物进入细胞。

　　如果直接把两者直接混合，两者容易很快形成聚合物，聚集相态多样，有可能使DNA暴露在表面，不容易进入细胞，进而降低转染效率。所以EZ Trans和DNA的混合顺序也很重要。

　　培养细胞大多会用到胎牛血清，血清成分复杂，没有人能说清成分及含量。细胞转染液成分比较明确，但是不能确定是会不会与胎牛血清的不明成分结合，事实上这种现象在大多数转染试剂中都会造成不良影响，所以在形成EZ Trans-DNA复合物过程中要避免血清的影响。

Q4：protocol提到，“24-48小时内检测转染效率”指的是去除含复合物的培养液换成含血清的培养基之后的24-48h，还是指加入复合物后转染24-48h？

A4：所有时间都是从EZ Trans-DNA复合物与细胞接触开始算。

Q5：我就是问的体内直接转染小鼠。你们现有的protocol是体外实验的方法?

A5：体内直接转染目前最多的是腺病毒，慢病毒，腺相关病毒。转染试剂直接在体内用的报道我们目前没有听过。现有的做法是细胞在体外培养，转染筛选后再打入体内。

文中涉及的生物试剂产品都为上海李记生物科技有限公司提供，还有WB技术服务等竭诚为您服务