Alexa Fluor 488 标记鬼笔环肽（绿色）

产品描述
　　鬼笔环肽是从一种菌类Amanita Dhalloides所提取出来的环肽。它与F-actin竞争性的结合。荧光标记的鬼笔环肽在纳克水平就可与F-actin选择性的结合并且易溶于水，为检测组织切片，培养细胞和无细胞体系中的actin的定位和定量提供了非常方便的标记方法。
　　本品为Alexa Fluor 488 标记鬼笔环肽（绿色），可发出高亮度、稳定的绿色荧光，染色反应特异性强，对比性高，适合用作F-actin的定性和定量检测。与Actin抗体比较，Alexa Fluor 488鬼笔环肽具有如下优点：(1)与actin亚单位一比一结合，并且不与G-actin结合，具有比Actin抗体更好的染色效果。(2)且本品的结合没有物种差异性，适用性广泛。(3)鬼笔环肽标记的非特异性信号可忽略，因而图像的反差较好。(4)染色与用于细胞分析的其他荧光染色*兼容，包括荧光蛋白、Qdot® 纳米晶体和其他Alexa Fluor偶联物（包含Alexa Fluor偶联二抗)。(5)经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。
技术资料
1. Ex(nm)：493
2. Em(nm)：517
3. 分子量：1900
4. 溶剂：DMSO
5. 结构式：

订购信息

保存方法
　　冰袋运输，收到货后可按需分装，并于-20℃避光干燥保存，避免反复冻融。1年有效。
使用方法
1. 准备1× Alexa Fluor 488标记鬼笔环肽工作液
吸取1 μL 1000×Alexa Fluor 488标记鬼笔环肽存储液到1 mL 含有1%BSA的PBS缓冲液中即可得到1×工作液。
【注】：不同的细胞染色后情况不同，相应Alexa Fluor488鬼笔环肽使用量也需根据不同情况而定。
2. 细胞染色步骤
（1）细胞培养过夜或更长，使其密度达到50~60%汇合度。
（2）吸掉培养液，37℃预热的1×PBS（pH 7.4）清洗细胞2次。
（3）使用含有3-4%甲醛的PBS溶液进行细胞固定，室温固定10~30 min。
【注】：避免固定剂中含有甲醇成分，因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
（4）室温条件下，用PBS清洗固定好的细胞2~3次，每次10 min。
（5）（可选）：室温条件下，用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化处理3~5 min，从而增加其通透性。
【注】：鬼笔环肽的分子量小，很容易通过细胞，一般情况下不需对细胞进行冷丙tong和TRITON X-100处理。
（6）室温条件下，用PBS清洗细胞2~3次，每次10 min。
（7）每孔加入 Alexa Fluor 488标记鬼笔环肽工作液100 μL /孔（96孔板），室温避光染色20~90 min，夏季时间相对短些。
（8）用PBS清洗细胞3次，每次5 min，去除掉多余的Alexa Fluor 488标记鬼笔环肽。
（9）（可选）：加入足量的即用型DAPI溶液对细胞核进行复染，如：100 μL /孔（96孔板），室温3~5 min。用PBS清洗细胞2次，每次5 min。
（10）于荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察，选择Alexa FluorTM 488激发/发射滤片（Ex/Em=493/517nm）和/或DAPI激发/发射滤片（Ex/Em=364/454nm）。