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产品描述
D-荧光素钾盐(超纯)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞后,导入研究动物如大小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。
D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光*钠盐,以及D-荧光*钾盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素(游离酸)水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。但钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。
D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光*钾盐(超纯) 可替代Goldbio/LUCK-1G/CAS:115144-35-9/PE122799/ Biovision K250-100等产品,优势及用法详见本文或咨询销售人员。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
D-荧光素钾盐(超纯)(D-Luciferin, Potassium Salt) | AC19L011 | 25mg |
D-荧光素钾盐(超纯)(D-Luciferin, Potassium Salt) | AC19L012 | 100mg |
D-荧光素钾盐(超纯)(D-Luciferin, Potassium Salt) | AC19L014 | 500mg |
D-荧光素钾盐(超纯)(D-Luciferin, Potassium Salt) | AC19L013 | 1g |
产品性质
中文别名(Chinese synonym) | D- 荧光*钾盐 |
英文别名(English synonym) | (S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt; D-Luciferin firefly, potassium salt; |
CAS号(CAS NO.) | 115144-35-9 |
分子式(Formula) | C11H7N2O3S2 K |
分子量(Molecular weight) | 318.42 g/mol |
外观(Appearance) | 淡黄色粉末 |
溶解性(Solubility) | 溶于水(60 mg/ml) |
纯度(Purity)(HPLC) | >99% |
保存方法
蓝冰运输,-20℃保存。有效期24个月。
使用方法
1.体外生物发光检测
(1)用蒸馏水溶解D-荧光*钾盐,配制成100 mM的储存液(200×,浓度30 mg/mL)。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。
(2)用预热好的组织培养基1:200稀释储存液,配制工作液(终浓度150 µg/mL)。
(3)去除培养细胞的培养基直至无残留。
(4)待图像分析前,向细胞内添加1×荧光素工作液,然后进行图像分析(或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号)。
2. 活体成像分析
(1)用无菌的DPBS(w/o Mg2+)配制D-荧光*钾盐工作液(15 mg/mL),0.2 μm 滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。
(2)注射量取决于注射方式,具体如下:
注射方式 | 剂量 |
静脉注射(25~27gauge针头) | 按10 μL/g体重浓度,加入相应体积的15mg/mL荧光素工作液 |
腹腔注射(25~27gauge针头) | 按10 μL/g体重浓度,加入相应体积的15mg/mL荧光素工作液 |
肌肉注射(27gauge针头) | 50 μL,浓度为1~2mg/mL荧光素工作液 |
鼻内注射(pipette) | 50 μL,浓度为3mg/mL荧光素工作液 |
(3)注射入体内10~20 min(待光信号达到峰值的稳定平台期),再进行成像分析。
【注】:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定峰值的信号检测时间和信号平台期。
注意事项
1.本品(firefly luciferin)和甲虫荧光素(beetle luciferin)都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl) -2-thiazoline-4-carboxylic acid,仅仅是不同公司在命名上的差异。
2.本品保存和操作的过程中都要避光。另外水溶性储存液过滤除菌后,可以-20℃或-80℃分装冻存,避免反复冻融。如果有条件,对储存液充氮气或氩气(防止氧化),稳定性和保存时间更长,长达1年。
3.注射方式,动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确实合适信号平台期和合适的检测时间。
4.荧光*钾盐和荧光*钠盐应用上没有差别,两者的差别在于物理性状上如外形和溶解性。钠盐的水溶性高于钾盐。从目前发表的文献来看,钾盐的使用率远高于钠盐,尤其是体内实验,两者功效相同。
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。