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胰*白酶(Trypsin)简称*酶,是一种丝*酸水解酶,能把多肽链中赖氨酸和精*酸残基中的羧基端切断。在组织细胞的提取、培养,以及体外细胞培养过程中,均会使用到胰*白酶消化液,用于水解细胞间蛋白质,使组织或细胞离散成单个细胞。
*酶在 37℃ pH 8.0 条件下消化能力*。常用*酶工作浓度为 0.25%。EDTA 可以螯合钙镁离子,*酶溶液中搭配 EDTA 使用可以加速细胞间连接蛋白的水解,起到增强消化的效果。酚红是一种 pH 指示剂,溶液偏碱性时呈紫红色,偏酸性时呈橘红色,近中性时呈粉红色。
本产品含 0.25%胰*白酶,溶于 Hank’s 缓冲液,添加 0.9 mM EDTA,含酚红指示剂,经 0.22 μm 过滤除菌。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
0.25%胰*白酶消化液(含EDTA,含酚红) | AC15L811 | 100 mL |
运输与保存
蓝冰运输。-20℃保存,有效期12个月。【注】:避免反复冻融。
使用方法
吸去细胞培养液,用无菌的 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞去除残余的血清。
加入适量本产品覆盖细胞,室温静置消化 1-5 min。(不同细胞消化时间不同)
显微镜下观察,当细胞出现明显收缩,用移液枪轻轻吹打细胞较容易将细胞吹打下来时,吸除*酶细
胞消化液,加入含血清的细胞培养液,轻轻吹打下细胞,制成细胞悬液,即可直接传代培养。【注】:如果用移液枪轻轻吹打时很难使细胞从板底脱落,表明消化时间不够,可加入*酶细胞消化液重新消化。切忌避免过度消化。
注意事项
本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况。
本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染。
本产品不宜 4℃长期保存,避免反复冻融,建议分装成小份后-20℃保存。
对于*酶中 EDTA、酚红的选择,可以根据实验需要,对于一般的肿瘤细胞,选择含 EDTA 的*酶消化液。对于较敏感、脆弱的细胞,例如原代细胞及很容易消化的细胞,选择不含 EDTA 的*酶消化液,如果细胞特别敏感,需要选择胰*白酶浓度更低的消化液。如果是需要用于流式细胞仪检测细胞凋亡,则选用不含 EDTA 的*酶消化液。
由于 Hank’s 溶液中 NaHCO3 含量较低,不建议将本产品用于 37℃的 CO2 培养箱中消化,如果放入 CO2相,溶液会迅速变酸性。
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